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选择合适的克隆位点,并对载体进行线性化。尽量选择无重复序列且载体克隆位点上下游20bp区域内GC含量在40%-60%之间的位点进行克隆。载体线性化方式有限制性内切酶酶切消化和反向PCR扩增。1)酶切制备线性化载体时,推荐使用双酶切线性化,线性化wqn全5.1 制备线性化载体 一步克隆试剂盒 克隆系列