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品牌 | NobleRyder/诺博莱德 | 货号 | BO6089 |
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规格 | 100T/48S | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 能催化水解木聚糖,也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
土壤酸性木聚糖酶(Soil Acidic Xylanase,S-ACX)测定试剂盒说明书
微量法 100T/48S
土壤酸性木聚糖酶测定试剂盒
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义:
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生,能催化水解木聚糖,也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶,可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及β-葡聚糖,降低酿造中物料的粘度,促进有效物质的释放,以及降低饲料中的非淀粉多糖,促进营养物质的吸收利用,因而广泛的应用于酿造和饲料工业中,ACX 一般分离自耐酸的真菌,细菌及部分霉菌。
测定原理:
ACX 在酸性环境下能将木聚糖降解成还原性寡糖和单糖,进一步在沸水浴条件下与 3,5-二硝基水杨酸发生显色反应,在 540nm 处有特征吸收峰,反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比,通过测定反应液在 540nm 吸光值增加速率,可计算ACX 活力。
组成:
产品名称 | BO6089-100T/48S | Storage |
缓冲液:液体 | 10ml | 4℃ |
试剂一:液体 | 3ml | 4℃避光 |
试剂二:液体 | 10ml | 4℃避光 |
说明书 | 一份 |
自备仪器和用品:
天平、常温离心机、震荡仪、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板。
样品处理:
新鲜土样风干,过 30-50 目筛。
测定操作表:
1、分光光度计/酶标仪预热 30min,调节波长至 540nm。
2、操作表
对照管 | 测定管 | |||
土样(g) | 0.02 | 0.02 | ||
缓冲液(μl) | 150 | 100 | ||
试剂一(μl) | 50 | |||
混匀,50℃震荡反应 30min,立即 90℃水浴 10min,8000g,25℃离心 10min,取上清 100μl | ||||
试剂二(μl) | 100 | 100 | ||
混匀,90℃水浴中显色 5min,取 180μl 于微量石英比色皿/96 孔板测定 540nm 处吸光值 A,分别记为A 对照管、A 测定管,△A=A 测定管-A 对照管。 |
S-ACX 计算公式:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准曲线:y = 2.5554x - 0.002 ,R2 = 0.9983
酶活定义:50℃,pH4.8 条件下,每克土壤每天分解木聚糖产生 1μmol 还原糖所需的酶量为一个酶活单位。
S-ACX 活力(μmol/d/g 土样)= (△A+0.002)÷ 2.5554 ×V 反总×103÷ W÷T÷ 150
=18.78 ×(△A+0.002)÷ W
V 反总:反应总体积,0.15ml;T:反应时间,1/48d;1000:1mmol/L =103μmol/L;150:木糖分子量。 b.用 96 孔板测定的计算公式如下
标准曲线:y = 1.2777x - 0.002 ,R2 = 0.9983
酶活定义:50℃,pH4.8 条件下,每克土壤每天分解木聚糖产生 1μmol 还原糖所需的酶量为一个酶活单位。
S-ACX 活力(μmol/d/g 土样)=(△A+0.002)÷1.2777×V 反总×103÷ W÷T÷ 150
= 37.56 ×(△A+0.002)÷ W
V 反总:反应总体积,0.15ml;T:反应时间,1/48d;1000:1mmol/L =103μmol/L;150:木糖分子量。
注意事项:
保证震荡反应 30min,使酶与底物充分接触。
注意 90℃水浴防止爆开,以免改变反应体系。
土壤酸性木聚糖酶测定试剂盒