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| 品牌 | NobleRyder/诺博莱德 | 货号 | BI6043 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 100T/96S | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 利用水提醇沉法提取总多糖,苯fen-硫酸法测定总多糖含量 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
总多糖含量测定试剂盒说明书
微量法 100 管/96 样
总多糖含量测定试剂盒 糖代谢
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：
多糖是生物体中广泛存在的物质，是一类由醛糖或酮糖通过糖苷键连接而成的天然高分子多聚物，它是生物体内重要的生物大分子，是维持生命活动正常运转的基本物质之一。
测定原理：
利用水提醇沉法提取总多糖，苯fen-硫酸法测定总多糖含量。
组成：
产品名称 | BI6043-100T/96S | Storage |
试剂一：液体 | 12ml | 4℃ |
试剂二：无水乙醇，自备 | -- | -- |
试剂三：浓硫酸，自备 | -- | -- |
说明书 | 一份 | |
自备仪器和用品：
酶标仪、台式离心机、可调式移液器、96 孔板、无水乙醇、浓硫酸、蒸馏水、水浴锅。
总多糖提取：
样本烘干粉碎，称取约 0.05g 样本，加入 1ml 水，充分匀浆。100℃水浴提取 2h（必须盖紧盖子防止水分流失），冷却后 10000g 离心 10min，取上清。吸取 0.2ml 上清，慢慢加入 0.8ml 无水乙醇，混匀后 4℃静置过夜，10000g 离心 10min，弃上清，沉淀中加入 1ml 水，充分混匀溶解沉淀。
测定步骤：
1、酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 490nm。
2、吸取 200µl 上清，加入 100µl 试剂一和 0.5ml 浓硫酸，混匀后 90℃水浴 20min，流水冷却。取 200µl 加入酶标板，于 490nm 下测定吸光值A。
总多糖含量计算：
以葡萄糖作为对照品，标准条件下测定回归方程为 y = 7.981x - 0.0037，R2 = 0.9973，x 为葡萄糖含量（mg/ml），
y 为吸光值。
总多糖含量(μg/g 干重)= (A +0.0037)÷7.981×V1÷V2×V3÷W×1000
=626.49×(A+0.0037) ÷W
V1：醇沉后重新溶解后的体积，1ml；V2：进行醇沉的体积，0.2ml；V3，提取时加入水的体积，1ml；W：样本质量，g；1000，mg 到μg 的换算系数。
总多糖含量测定试剂盒 糖代谢
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