乙醛tuo氢酶 (EC 1.2.1.10)是醛脱氢酶的一种，广泛存在于各种动物、植物和微生物体内。主要作用是将乙醛氧化成乙酸，在酒精代谢中起主要作用。
乙醛tuo氢酶试剂盒 辅酶Ⅰ

乙醛tuo氢酶（acetaldehyde dehydrogenase，ALDH）试剂盒说明书

分光光度法 50 管/48 样

乙醛tuo氢酶试剂盒 辅酶Ⅰ

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

乙醛tuo氢酶 (EC 1.2.1.10)是醛脱氢酶的一种，广泛存在于各种动物、植物和微生物体内。主要作用是将乙醛氧化成乙酸，在酒精代谢中起主要作用。在人类和许多动物体内，线粒体乙醛tuo氢酶能把对生物体有害的醇类转化，所以在细胞解毒研究中乙醛tuo氢酶受到高度关注；同时，乙醛tuo氢酶在分子生物学以及相关疾病的检测方面有较广泛的研究应用。

测定原理：

在辅酶Ⅰ存在的条件下，乙醛tuo氢酶催化乙醛和 NAD+转化为乙酸和NADH，在 340nm 处的吸光值会增加，测定 340nm 处的吸光值变化，可计算得到乙醛tuo氢酶的活性。

组成：

自备仪器和用品：

天平、离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计、1ml 石英比色皿、蒸馏水。

ALDH 提取：

组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1ml 提取液）进行冰浴匀浆，然后，10000g，4℃，离心 20min。

细胞：按照细胞数量（104 个）：提取液体积（ml）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1ml提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后 10000g，4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。

液体：直接检测。

测定操作表：

ALDH 酶活计算：

按蛋白浓度计算

酶活定义：每毫克蛋白每分钟催化还原 1nmol NAD+的酶量为 1 个酶活单位。

ALDH 酶活（nmol/min/mg prot）=

按样本质量计算

A ×V 反总÷（V 样×Crp）÷T= 804×△A÷Cpr

 d

酶活定义：每克样品每分钟催化还原 1nmol NAD+的酶量为 1 个酶活单位。

ALDH 酶活（nmol/min/g 鲜重）=

按照细胞数量计算

A ×V 反总÷（V 样×W÷V 样总）÷T = 804×△A÷W

 d

酶活定义：每 104 个细胞每分钟催化还原 1nmol NAD+的酶量为 1 个酶活单位。

ALDH 酶活（nmol/min/104cell）=数量（万个）

按液体体积计算

A ×V 反总÷（V 样÷V 样总×细胞数量（万个））÷T= 804×△A÷细胞

 d

酶活定义：每ml 样本每分钟催化还原 1nmol NAD+的酶量为 1 个酶活单位。

ALDH 酶活（nmol/min/ml）=

A ×V 反总÷V 样÷T= 804×△A

 d

：NADH 微摩尔消光系数，6.22×10-3 L/µmol /cm；d：比色皿光径，1cm；V 反总：反应体系总体积，1ml；

V 样：反应体系中样本体积，0.2ml；Cpr：样本蛋白浓度，mg/ml；W：样本质量，g，T：反应时间：1min

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