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品牌 | NobleRyder/诺博莱德 | 货号 | BC6017 |
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规格 | 50T/24S | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 其活性与核酸和蛋白合成密切相关,能够反映肠道机械屏障的完整性和受损伤程度 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
辅酶ⅡNADP(H)含量测定试剂盒(分光光度法)
分光光度法 50 管/24 样
辅酶ⅡNADP含量测定试剂盒分光光度法氧化
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义:
DAO(EC1.4.3.6)广泛存在于动物(肠粘膜、肺、肝脏、肾脏等)、植物和微生物中。催化多胺氧化为醛,其活性与核酸和蛋白合成密切相关,能够反映肠道机械屏障的完整性和受损伤程度。
测定原理:
DAO 催化尸胺产生醛和过氧化氢,外源添加过量的辣根过氧化物酶,催化过氧化氢氧化邻联茴香胺生成氧化型邻联茴香胺,在 460nm 处有特征吸收峰,通过测定该波长吸光度增加速率,计算 DAO 活性。
试剂组成和配制:
产品名称 | BC6017-50T/24S | Storage |
提取液:液体 | 80ml | 4℃ |
试剂一:液体 | 0.6ml | 4℃ |
试剂二:液体 | 6ml | 4℃ |
试剂三:液体 | 3ml | 4℃ |
说明书 | 一份 |
自备仪器和用品:
天平、低温离心机、可见分光光度计、1 ml 玻璃比色皿、蒸馏水。
粗酶液提取:
1、组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1ml
提取液)进行冰浴匀浆,然后 10000g,4℃离心 20min,取上清,置冰上待测。
2、细菌、真菌:按照细胞数量(104 个):提取液体积(ml)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1ml 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);然后 10000g, 4℃,离心 10min,取上清置于冰上待测。
3、血清等液体:直接测定。
测定步骤:
对照管 | 测定管 | |
粗酶液(μl) | 250 | 250 |
提取液(μl) | 640 | 540 | ||
试剂一(μl) | 10 | 10 | ||
试剂二(μl) | 100 | 100 | ||
试剂三(μl) | 100 |
混匀,37℃水浴 30min,1ml 玻璃比色皿,对照管调零,测定 A460
辅酶ⅡNADP含量测定试剂盒分光光度法氧化