无机磷主要指磷酸根，参与生物体内多种代谢，包括能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化和脱磷酸化等等，此外促进碳水化合物的合成、转化和转运。
组织无机磷含量测定试剂盒 离子系列

组织无机磷含量测定试剂盒说明书

分光光度法 50 管/48 样

组织无机磷含量测定试剂盒 离子系列

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

无机磷主要指磷酸根，参与生物体内多种代谢，包括能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化和脱磷酸化等等，此外促进碳水化合物的合成、转化和转运。

测定原理：

钼蓝与磷酸根生成 660nm 有特征吸收峰的物质，通过测定 660nm 光吸收可计算无机磷含量。

组成：

试剂三：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前配制，加入 20 ml 蒸馏水，充分溶解后加入试剂二（全部），混匀。

自备仪器和用品：

可见分光光度计、离心机、水浴锅、可调式移液枪、1ml 玻璃比色皿和蒸馏水。

无机磷提取：

按照组织质量（g）：试剂一体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1ml 试剂一）进行冰浴匀浆。10000rpm，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

测定：

分光光度计预热 30 min，调节波长到 660 nm，蒸馏水调零。

打开水浴锅，调节温度到 40℃。

空白管：取EP 管，依次加入 500μl 蒸馏水，500μl 试剂三，混匀后置于 40℃水浴保温 10min，室温冷却 10 min 后于 660 nm 测定吸光度，记为A 空白管。

标准管：取 EP 管，依次加入 50μl 标准液，450μl 蒸馏水，500μl 试剂三，混匀后置于 40℃水浴保温 10min，室温冷却 10 min 后于 660 nm 测定吸光度，记为A 标准管。

测定管：取 EP 管，依次加入 50μl 上清液，450μl 蒸馏水，500μl 试剂三，混匀后置于 40℃水浴保温 10min，室温冷却 10 min 后于 660 nm 测定吸光度，记为A 测定管。

注意：空白管和标准管只需测定一次。

组织无机磷含量计算公式：

按照蛋白含量计算

无机磷含量(μmol/mg prot)= [C 标准液×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)]×V 总÷Cpr

=1×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)÷Cpr

按照样本质量计算

无机磷含量(μmol/g )= [C 标准液×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)]×V 总÷W

=1×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)÷W

C 标准液：1mmol/L；V 总：上清液总体积，1ml=0.001 L；Cpr：样本蛋白浓度，mg/ml；W：样品质量， g。

注意事项：

试剂三需临用前配制，并且当天使用完毕。

40min 内完成比色。

最di检出限为 10μmol/L。

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