脂蛋白酯酶是脂肪细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞、乳腺细胞及巨噬细胞等实质细胞合成的一种酶，可催化甘油三脂水解为脂肪酸和单酸甘油酯，以供组织氧化供能和贮存，并在不同的组织表现出不同的生理意义。
脂蛋白酯酶试剂盒 脂肪酸系列

脂蛋白酯酶（Lipoprotein lipase，LPL）试剂盒说明书

微量法 100T/48S

脂蛋白酯酶试剂盒 脂肪酸系列

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

脂蛋白酯酶是脂肪细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞、乳腺细胞及巨噬细胞等实质细胞合成的一种酶，可催化甘油三脂水解为脂肪酸和单酸甘油酯，以供组织氧化供能和贮存，并在不同的组织表现出不同的生理意义。

测定原理：

脂蛋白酯酶水解 4-硝基苯棕榈酸酯产生 4-硝基苯fen，在 400nm 有特征吸收峰。

组成：

自备仪器和用品：

天平、冷冻离心机、研钵、水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板。

样品处理：

组织：按照质量（g）：试剂一体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g，加入 1ml 试剂一）加入试剂一，冰浴匀浆后于 4℃，10000g 离心 10min，取上清待测。

细胞：按照细胞数量（104 个）：试剂一体积（ml）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1ml试剂一）加入试剂一，冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后于 4℃，10000g 离心 10min，取上清待测。

血清：直接测定。

测定操作：

计算公式：

用微量石英比色皿测定的计算公式如下 标准曲线：y= 0.0581x -0.0169，R2=0.9982

按照蛋白浓度计算

酶活性定义：在 45℃，pH7.5 条件下，每毫克蛋白每分钟水解产生 1μmol 4-硝基苯fen为一个酶活力单位。 LPL 活性（μmol /min/mg prot）= （△A+0.0169）÷ 0.0581×V 反总÷（V 样×Cpr）÷T

= 17.21×（△A+0.0169）÷Cpr

按照样本质量计算

酶活性定义：在 45℃，pH7.5 条件下，每克组织每分钟水解产生 1μmol 4-硝基苯fen为一个酶活力单位。 LPL 活性（μmol /min/g 鲜重）=（△A+0.0169）÷0.0581×V 反总÷（W×V 样÷V 样总）÷T

= 17.21×（△A+0.0169）÷W

按照细胞数量计算

酶活性定义：在 45℃，pH7.5 条件下，每 104 个细胞每分钟水解产生 1μmol 4-硝基苯fen为一个酶活力单位。 LPL 活性（μmol /min/104 cell）= （△A+0.0169）÷0.0581×V 反总÷（V 样×细胞数量÷V 样总）÷T= 17.21×（△A+0.0169）÷细胞数量

按照液体体积计算

酶活性定义：在 45℃，pH7.5 条件下，每毫升血清每分钟水解产生 1μmol 4-硝基苯fen为一个酶活力单位。 LPL 活性（μmol /min/ml）=（△A+0.0169）÷0.0581×V 反总÷V 样÷T

= 17.21×（△A+0.0169）

V 反总：反应总体积，0.2ml；V 样：反应体系中加入样本体积，0.02ml；W：样本质量，g；V 样总：加入提取液体积，1ml；T：反应时间，10min

b．用 96 孔板测定的计算公式如下

标准曲线：y= 0.029x -0.0169，R2=0.9982

按照蛋白浓度计算

酶活性定义：在 45℃，pH7.5 条件下，每毫克蛋白每分钟水解产生 1μmol 4-硝基苯fen为一个酶活力单位。 LPL 活性（μmol /min/mg prot）= （△A+0.0169）÷ 0.029×V 反总÷（V 样×Cpr）÷T

= 34.42×（△A+0.0169）÷Cpr

按照样本质量计算

酶活性定义：在 45℃，pH7.5 条件下，每克组织每分钟水解产生 1μmol 4-硝基苯fen为一个酶活力单位。 LPL 活性（μmol /min/g 鲜重）=（△A+0.0169）÷0.029×V 反总÷（W×V 样÷V 样总）÷T

= 34.42×（△A+0.0169）÷W

按照细胞数量计算

酶活性定义：在 45℃，pH7.5 条件下，每 104 个细胞每分钟水解产生 1μmol 4-硝基苯fen为一个酶活力单位。 LPL 活性（μmol /min/104 cell）= （△A+0.0169）÷0.029×V 反总÷（V 样×细胞数量÷V 样总）÷T

=34.42×（△A+0.0169）÷细胞数量

按照液体体积计算

酶活性定义：在 45℃，pH7.5 条件下，每毫升血清每分钟水解产生 1μmol 4-硝基苯fen为一个酶活力单位。 LPL 活性（μmol /min/ml）=（△A+0.0169）÷0.029×V 反总÷V 样÷T

= 34.42×（△A+0.0169）

V 反总：反应总体积，0.2ml；V 样：反应体系中加入样本体积，0.02ml；W：样本质量，g；V 样总：加入提取液体积，1ml；T：反应时间，10min

注意事项：

试剂三加入混匀后静置两分钟立即测定，否则影响吸光值。

吸光值过高或者测定结果不稳定，则将酶液进行适当的稀释，并在计算公式中乘以稀释倍数。

脂蛋白酯酶试剂盒 脂肪酸系列