速效磷是土壤中可被植物吸收的磷组分，包括全部水溶性磷、部分吸附态磷及有机态磷，土壤中速效磷是限制植物生长主要因子之一。
中性、碱性土壤速效磷试剂盒

中性、碱性土壤速效磷试剂盒说明书

微量法 100T/96S

中性、碱性土壤速效磷试剂盒

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

速效磷是土壤中可被植物吸收的磷组分，包括全部水溶性磷、部分吸附态磷及有机态磷，土壤中速效磷是限制植物生长主要因子之一。

测定原理：

用弱碱性提取碱溶性磷和吸附态磷，用钼锑抗比色法测定。

试剂组成和配制：

试剂二： 粉剂×1 支，4℃避光保存。临用前加 2ml 蒸馏水溶解。用不完的试剂 4℃保存。试剂三： 粉剂×3 支，4℃避光保存。临用前加 1ml 蒸馏水溶解。现配现用。

自备仪器和用品：

天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、震荡仪。

样本处理：

新鲜土样风干，过 30-50 目筛，按照土壤质量（g）：提取液体积(ml)为 1：20 的比例（建议称取约 0.05g土样，加入 1ml 提取液），振荡提取 1h，10000g ，25℃离心 10min，取上清液待测。

测定步骤：

1、取试剂三一支，加入 1ml 蒸馏水充分溶解待用。

2、显色液的配制（可测 50 个样）：取EP 管一支，加入 660μl 试剂一，再加入 100μl 试剂二，充分混匀后，再加入 240μl 试剂三，充分混匀待用；配好的显色液应为黄色，若变蓝则为磷污染；显色液必须现配现用；若一次性测不了 50 个样，可按比例缩小各试剂体积。

3、操作表：

注意事项：

1、配好的显色液当天用完，变蓝则不能使用。

2、最di检出限为 0.2μg/ml。

计算公式：

用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线：y = 0.1164x-0.012，R2 = 0.9958，x 为标准品浓度（mg/L），y 为吸光值。速效磷含量（mg/kg 干重）=（△A+0.012）÷ 0.1164×V 样÷（W×V 样÷V 样总）= 8.591×（△A+0.012）÷W

V 样：加入反应体系中样本体积，0.04ml；V 样总：加入提取液体积，1ml，W：样本质量，约 0.05g

用 96 孔板测定的计算公式如下

标准曲线：y = 0.0582x-0.012，R2 = 0.9958，x 为标准品浓度（mg/L），y 为吸光值。

速效磷含量（mg/kg 干重）=（△A+0.012）÷ 0.0582×V 样÷（W×V 样÷V 样总）

= 17.182×（△A+0.012）÷W

V 样：加入反应体系中样本体积，0.04ml；V 样总：加入提取液体积，1ml，W：样本质量，约 0.05g