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品牌 | NobleRyder/诺博莱德 | 规格 | 100T/48S |
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供货周期 | 现货 | 主要用途 | 木质素过氧化物酶氧化藜芦醇生成藜芦醛,在 310nm 处有特征吸收峰 |
应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
土壤木质素过氧化物酶(Soil lignin peroxidase,S-Lip)试剂盒说明书
微量法 100T/48S
土壤木质素过氧化物酶试剂盒
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义:
木质素过氧化物酶(EC1.11.1.14)是一种含亚铁血红素的过氧化物酶,属于木质素降解酶系,在木质素生物降解、造纸工业、纺织工业、芳香化合物转化与降解及环境污染控制等方面具有较大的应用潜力。
测定原理:
木质素过氧化物酶氧化藜芦醇生成藜芦醛,在 310nm 处有特征吸收峰。
试剂组成和配制:
产品名称 | BO6063-100T/48S | Storage |
试剂一:液体 | 25ml | 4℃ |
试剂二:液体 | 15ml | 4℃避光 |
试剂三:液体 | 10ml | 4℃ |
说明书 | 一份 |
自备仪器和用品:
天平、低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板(UV 板)。
样品处理:
新鲜土样风干,过 30-50 目筛。
测定步骤:
对照管 | 测定管 | |
土样(g) | 0.04 | 0.04 |
甲苯(μl) | 30 | 30 |
25℃静置 15min | ||
试剂一(μl) | 200 | |
蒸馏水(μl) | 200 | |
试剂二(μl) | 120 | 120 |
试剂三(μl) | 80 | 80 |
30℃震荡反应 3h,冰浴 5min,12000g,4℃离心 10min,取上清 200μl,于微量石英比色皿/96 孔板(UV)板,测定 310nm 处吸光值,分别记为A 对照和A 测定,△A=A 测定-A 对照 |
酶活计算公式:
用微量石英比色皿测定的计算公式如下
酶活性定义:每克土壤每天氧化 1nmol 藜芦醇所需的酶量为一个酶活力单位。
S-LiP 活性(nmol/d /g 土样)=
A
d
×V 反总÷W÷T= 344×△A÷W
ε:藜芦醛摩尔消光系数:9300L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V 反总:反应总体积,0.4ml; W:样本质量,g;T:反应时间,3h
用 96 孔板测定的计算公式如下
酶活性定义:每克土壤每天氧化 1nmol 藜芦醇所需的酶量为一个酶活力单位。
S-LiP 活性(nmol/d /g 土样)=
A
d
×V 反总÷W÷T= 688×△A÷W
ε:藜芦醛摩尔消光系数:9300L/mol/cm;d:比色皿光径,0.5cm;V 反总:反应总体积,0.4ml; W:样本质量,g;T:反应时间,3h。
土壤木质素过氧化物酶试剂盒