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| 品牌 | NobleRyder/诺博莱德 | 货号 | BO6001 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 50T/24S | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的 NH3-N | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
土壤脲酶（Solid-Urease，S-UE）测定试剂盒说明书
分光光度法 50 管/24 样
土壤脲酶测定试剂盒
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：
S-UE 能够水解尿素，产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。
测定原理：
利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的 NH3-N。
试剂的组成和配制：
产品名称 | BO6001-50T/24S | Storage |
试剂一：甲苯 | 10ml(自备） | 4℃ |
试剂二：粉剂 | 1 瓶 | -4℃ |
试剂三：液体 | 65ml | 4℃ |
试剂四：A 液 | 1ml | 4℃ |
试剂四：B 液 | 4ml | 4℃ |
试剂五：液体 | 5ml | 4℃ |
说明书 | 一份 | |
试剂二：粉剂×1 瓶，临用前加入 20ml 蒸馏水，充分溶解待用，4℃保存；用不完的试剂 4℃保存；试剂四A 液：液体 1ml×1 瓶，4℃保存；试剂四B 液：液体 4ml×1 瓶，4℃保存；临用前将A 液倒入B 液中混合，待用；用不完的试剂 4℃保存一周。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 ml 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
样品处理：
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干，过 30~50 目筛。
测定步骤：
1、培养
测定管 | 对照管 | |||||||
风干土样(g) | 0.25 | 0.25 | ||||||
试剂一（μl） | 125 | 125 | ||||||
振荡混匀，室温放置 15min | ||||||||
试剂二（μl） | 625 | |||||||
蒸馏水（μl） | 625 | |||||||
试剂三（μl） | 1250 | 1250 | ||||||
混匀，放入 37℃水浴培养 24h 后，10000g 25℃离心 10min，取上清液。 | ||||||||
2、将培养结束的上清液稀释 10 倍（取 0.1ml 上清液，加入 0.9ml 蒸馏水）。
3、测氨量：
测定管 | 对照管 | |
稀释后的上清液（μl） | 400 | 400 |
试剂四（μl） | 80 | 80 |
试剂五（μl） | 60 | 60 |
充分混匀，室温放置 20min | ||
蒸馏水（μl） | 460 | 460 |
混匀， 578nm 处蒸馏水调零，测A 值，ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。
脲酶活力计算：
标准条件下测定的回归方程为y = 0.0915x +0.0373；x 为标准品浓度（μg/ml），y 为吸光值。单位的定义：每天每 g 土样中产生 1μg NH3-N 定义为一个酶活力单位。
脲酶活力（μg/d /g 土样）＝(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V 反总÷W÷T =874×(ΔA -0.0373)
10：稀释倍数；T：反应时间，1d； V 反总：反应体系总体积：2ml；W：样本质量，0.25g。
土壤脲酶测定试剂盒
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