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| 品牌 | NobleRyder/诺博莱德 | 货号 | BM6007 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 50T/24S | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 测定SBE 活性在淀粉生物合成、优质农作物品种选育和品质遗传改良研究中具有重要 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
淀粉分支酶（Starch branching enzyme，SBE）试剂盒说明书
分光光光度法 50 管/24 样
淀粉分支酶试剂盒
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：
SBE（EC 2.4.1.18）主要存在于植物中，是参与支链淀粉合成的关键酶，测定SBE 活性在淀粉生物合成、优质农作物品种选育和品质遗传改良研究中具有重要意义。
测定原理：
直链淀粉和碘结合后在 660nm 有特征光吸收，SBE 使直链淀粉含量减少，从而降低了淀粉-碘复合物在 660nm 吸收值，一定时间内吸光度下降的百分率可以反映SBE 活性。
组成：
产品名称 | BM6007-50T/24S | Storage |
提取液：液体 | 60ml | 4℃ |
试剂一：液体 | 20ml | 4℃ |
试剂二：粉剂 | 2 支 | 4℃ |
试剂三：液体 | 25ml | 4℃ |
试剂四：液体 | 5ml | 4℃ |
说明书 | 1 份 | |
试剂二临用前每支加入 1mL 蒸馏水，95℃沸水浴充分溶解后备用；用不完的试剂 4℃保存；
自备仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水
粗酶液制备：
按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤：
试剂名称（μL） | 对照管 | 测定管 |
95℃水浴 1min 后灭活的粗酶液 | 250 | |
粗酶液 | 250 |
试剂一 | 320 | 320 |
试剂二 | 30 | 30 |
混匀，37℃准确保温 20 min，95℃水浴 5min（盖紧防止水分散失），冷却
试剂三 | 500 | 500 |
试剂四 | 40 | 40 |
混匀，室温静置 10min，用蒸馏水调零，660nm 处读取各管吸光值。
注意：
1、可以在不同对照管中加入不同样品的粗酶液，然后集中进行 5min 95℃水浴处理。
2、试剂二如有沉淀，务必沸水浴溶解后使用。
SBE 活力单位的计算：
1、按照蛋白浓度计算
单位的定义：以波长 660nm 的吸光度下降百分率表示，每 mg 蛋白在反应体系中每降低 1％碘蓝值为一个酶活性单位。
SBE 活性(U/mg prot)=( A 对照管-A 测定管)/A 对照管÷Cpr ×100 2、按照样本鲜重计算
单位的定义：以波长 660nm 的吸光度下降百分率表示，每g 组织在反应体系中每降低 1％碘蓝值为一个酶活性单位。
SBE 活性(U/g 鲜重)=(A 对照管-A 测定管)/A 对照管÷(W÷V 样总)×100
V 样总：提取液总体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样品质量，g。
淀粉分支酶试剂盒
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