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品牌 | NobleRyder/诺博莱德 | 货号 | BI6009 |
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规格 | 100T/96S | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 山li醇广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,不仅是糖运输形式之一 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
山li醇含量试剂盒说明书
微量法 100 管/96 样
山li醇含量试剂盒 糖代谢
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义:
山li醇广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,不仅是糖运输形式之一,而且与生物抗逆性和食物风味密切相关。因此,在糖代谢、抗逆性和食品研究中经常需要检测山li醇含量变化。
测定原理:
山li醇在碱性溶液中与铜离子形成蓝色络合物,在 655nm 波长有特征吸收峰。
组成:
产品名称 | BI6009-100T/96S | Storage |
试剂一:液体 | 3.5ml | 4℃ |
试剂二:液体 | 3.5ml | 4℃ |
说明书 | 一份 |
自备仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。
山li醇的提取:
按照组织质量(g):蒸馏水体积(ml)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1ml 蒸馏水),研磨成匀浆,95℃水浴 10 分钟(盖紧,以防止水分散失),冷却后,8000g,25℃离心 10min,取上清液待测。
测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 655nm,蒸馏水调零。
2、加样表(在EP 管中依次加入下列试剂):
试剂(μl) | 空白管 | 测定管 |
试剂一 | 35 | 35 |
试剂二 | 35 | 35 |
样本 | 230 | |
蒸馏水 | 230 |
混匀后室温静置 15min,8000g,25℃离心 10min,取 200μl 上清液至微量石英比色皿或 96 孔板中,测 655nm
下吸光值A,计算ΔA=A 测定管-A 空白管。空白管只要做一管。
山li醇含量计算:
用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1、标准条件下测定回归方程为 y = 0.352x - 0.002;x 为标准品浓度(mg/ml),y 为吸光值。
2、按照样品质量计算
山li醇含量(mg /g 鲜重)=[(ΔA+0.002) ÷0.352×V1]÷(W×V1÷V2)=2.84×(ΔA+0.002) ÷W
3、按照样本蛋白浓度计算
山li醇含量(mg /mg prot)=[(ΔA+0.002) ÷0.352×V1]÷(V1×Cpr)=2.84×(ΔA+0.002) ÷Cpr
V1:加入样本体积,0.23ml;V2:加入提取液体积,1 ml;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml;W:样本质量, g
用 96 孔板测定的计算公式如下
1、标准条件下测定回归方程为 y = 0.176x - 0.002;x 为标准品浓度(mg/ml),y 为吸光值。
2、按照样品质量计算
山li醇含量(mg /g 鲜重)=[(ΔA+0.002) ÷0.176×V1]÷(W×V1÷V2)=5.68×(ΔA+0.002) ÷W
3、按照样本蛋白浓度计算
山li醇含量(mg /mg prot)=[(ΔA+0.002) ÷0.176×V1]÷(V1×Cpr)=5.68×(ΔA+0.002) ÷Cpr
V1:加入样本体积,0.23ml;V2:加入提取液体积,1 ml;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml;W:样本质量, g
注意:最di检测限为 1μg/g 鲜重或 0.01μg /mg prot
山li醇含量试剂盒 糖代谢