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品牌 | NobleRyder/诺博莱德 | 货号 | BH6009 |
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规格 | 50T/48S | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 能促进人体发育、增强免疫功能,并有提高中枢神经组织功能的作用 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
赖an酸(lysine,Lys)含量测定试剂盒说明书
分光光度法 50 管/48 样
赖an酸lysine Lys含量测定试剂盒 氨基酸
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义:
赖an酸是人体必需氨基酸之一,能促进人体发育、增强免疫功能,并有提高中枢神经组织功能的作用。赖an酸为碱性必需氨基酸。由于谷物食品中的赖an酸含量甚低,且在加工过程中易被破坏而缺乏,故称为第一限制性氨基酸。
测定原理:
蛋白质中的赖an酸具有一个游离的ε-NH2,它与茚三酮试剂反应生成蓝紫色物质,其颜色的深浅在一定范围内与赖an酸的含量成线性关系。亮an酸与赖an酸的碳原子数目相同,而且仅有—个游离氨基(ε-NH2),所以通常用亮an酸配制标准液。
组成:
产品名称 | BH6009-50T/48S | Storage |
提取液:液体 | 50ml | 4℃ |
试剂一:粉剂 | 1 瓶 | 4℃ |
试剂二:液体 | 12.5ml | 4℃ |
试剂三:液体 | 15ml | 4℃ |
试剂四:60%乙醇(自备) | 1 瓶 | 4℃ |
说明书 | 1 份 |
试剂一临用前加入 12.5ml 试剂三充分溶解混匀;
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1ml 玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水、水浴锅。
赖an酸提取:
样本烘干粉碎,称取约 0.01g 样本,加入 1ml 提取液,充分匀浆。80℃水浴提取 20min,冷却后 10000g
离心 10min,取上清待测。
测定步骤:
1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 570nm,蒸馏水调零。
2、工作液的配制:取 10ml 试剂一与 10ml 试剂二混合摇匀,取上清备用。用不完的试剂 4℃保存。
3、在有盖EP 管中加入下列试剂:
试剂名称(μl) | 测定管 | 空白管 |
样本 | 200 | |
提取液 | 200 | |
工作液 | 400 | 400 |
混匀,80℃水浴 30min(盖紧,以防止水分散失),冷却至常温。
试剂四 | 600 | 600 |
混匀,取 1000μl 至 1ml 玻璃比色皿中,于 530nm 波长处记录吸光值A。△A=A 测定管-A 空白管。空白管只要做一管。
赖an酸含量计算:
标准条件下测定回归方程为 y = 0.0062x - 0.0212;x 为赖an酸含量(µg/ml),y 为吸光值。
按照蛋白浓度计算
赖an酸含量(µg/mg prot)=[(△A +0.0212)÷0.0062×V1]÷(Cpr ×V1)×1.1515
=185.73×(△A+0.0212) ÷Cpr
按照样本质量计算
赖an酸含量(µg/g 干重)=[(△A +0.0212)÷0.0062×V1]÷(W ×V1÷V2)×1.1515
=185.73×(△A+0.0212) ÷W
V1:加入反应体系中样本体积,0.2ml;V2:加入提取液体积,1 ml; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml; W:样本质量,g;1.1515,校正系数。
赖an酸lysine Lys含量测定试剂盒 氨基酸