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品牌 | NobleRyder/诺博莱德 | 货号 | BD6015 |
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规格 | 50T/48S | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基,可攻击生物大分子,如脂质 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
超氧阴离子清除能力试剂盒说明书
分光光度法 50 管/48 样
超氧阴离子清除能力试剂盒 抗氧
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义:
超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基,可攻击生物大分子,如脂质、蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等,使其交链或者断裂,引起细胞结构和功能的破坏,与机体衰老和病变有很密切的关系,清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的关注。
测定原理:
AP-TEMED 系统产生超氧阴离子,与盐酸羟胺反应生成 NO2-,NO2-与对氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成红色的偶氮化合物,在 530nm 处有特征吸收峰,样品对超氧阴离子的清除能力与 530nm 的吸光值呈负相关。
组成:
产品名称 | BD6015-50T/48S | Storage |
提取液:液体 | 50ml | 4℃ |
试剂一:液体 | 3ml | 4℃避光 |
试剂二:粉剂 | 一瓶 | 4℃避光 |
试剂三:液体 | 15ml | 4℃ |
试剂四:液体 | 15ml | 4℃避光 |
试剂五:液体 | 15ml | 4℃避光 |
说明书 | 一份 |
自备仪器和用品:
天平、研钵、低温离心机、可见分光光度计、1 ml 玻璃比色皿、恒温水浴锅。
样品处理:
组织:按照质量(g):提取液体积(ml)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g,加入 1ml 提取液)加入提取液,冰浴匀浆后于 4℃,10000g 离心 10min,取上清置于冰上待测。
细胞:按照细胞数量(104 个):提取液体积(ml)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1ml提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);然后 4℃,10000g离心 10min,取上清置于冰上待测。
培养液或其它液体:直接检测。
粉剂药物可配制成相同浓度,比如 1mg/ml。
测定操作表:
对照管 | 测定管 | |
试剂一(μl) | 40 | 40 |
试剂二(μl) | 160 | 160 |
H2O(μl) | 100 | |
充分混匀,25℃反应 1min | ||
样品(μl) | 100 | |
试剂三(μl) | 200 | 200 |
充分混匀,37℃反应 30min | ||
试剂四(μl) | 200 | 200 |
试剂五(μl) | 200 | 200 |
充分混匀,37℃显色 20min,于 1ml 玻璃比色皿,在 530nm 处测 定对照管和测定管的吸光值,分别记为 A 对照管和A 测定管。 |
注意:对照管只需测定一次。
计算公式:
超氧阴离子清除率 I%= A对照管- A测定管100%
A对照管
注意事项:
试剂一 4℃可保存 2 个月,配制好的试剂二 4℃可保存一周,建议实验前配制,并尽快使用。
样品处理完后立即进行测定,或者低温保存不超过 24 小时。
超氧阴离子清除能力试剂盒 抗氧