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| 品牌 | NobleRyder/诺博莱德 | 货号 | BC6011 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 50T/48S | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 具有止血、抑制微生物、抗过敏、抗突变、抗肿瘤、抗衰老等生理活性 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
单宁含量试剂盒说明书
分光光度法 50 管/48 样
单宁含量试剂盒 氧化
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：
单宁是一类广泛存在于植物体内的多元酚化合物，又称植物多酚。具有du特的化学性质和多种生理活性，如能与蛋白质、生物碱、多糖结合；能与多种金属离子发生络合或静电作用；具有止血、抑制微生物、抗过敏、抗突变、抗肿瘤、抗衰老等生理活性。
测定原理：
单宁在碱性环境下与磷钼酸反应，生成蓝色化合物，在 760nm 处有最大吸收峰。
试剂的组成和配制：
产品名称 | BC6011-50T/48S | Storage |
试剂一：液体 | 10ml | 4℃ |
试剂二：液体 | 8ml | 4℃ |
说明书 | 一份 | |
需自备仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1ml 玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。
单宁的提取：
按照组织质量（g）：蒸馏水体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1ml 蒸馏水），充分匀浆后转移到EP 管中，80℃水浴提取 30min， 8000 g，25℃离心 10 min，取上清液待测。
测定步骤：
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 760nm，蒸馏水调零；试剂一和试剂二 37℃预热 10min以上；
2、操作表：
试剂名称（µl） | 对照管 | 测定管 |
样本 | 25 | |
蒸馏水 | 675 | 650 |
试剂一 | 175 | 175 |
混匀，室温静置 5min
混匀，室温静置 30min，760nm 处读取吸光值A，ΔA=A 测定-A 对照，对照管只要做一管。
单宁含量计算：
1、标准条件下测定的回归方程为 y = 1.6418x +0.0134；x 为标准品浓度(mg/ml)，y 为ΔA(A 测定-A 对照)。
2、按样本鲜重计算：
单宁含量（mg /g 鲜重）= [(ΔA-0.0134) ÷1.6418×V1]÷（W×V1÷V2）=0.609×(ΔA-0.0134) ÷W。
3、按样本蛋白浓度计算：
单宁含量(mg/mg prot)= [(ΔA-0.0134) ÷1.6418×V1]÷(V1×Cpr)=0.609×(ΔA-0.0134) ÷Cpr。
V1：加入样本体积，0.025ml；V2：加入提取液体积，1ml； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；W：样本鲜重，g。
注意：
1、 ΔA 控制在 0.02-0.8 范围内，若ΔA 大于 0.8，将样本提取上清液用蒸馏水稀释 10 倍后检测，计算公式中乘以相应稀释倍数。
2、标准曲线线性范围为：0.025mg/ml-0.5mg/ml。
单宁含量试剂盒 氧化
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