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品牌 | NobleRyder/诺博莱德 | 货号 | 43016 |
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规格 | 100次 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 用于微量DNA的琼脂糖凝胶 DNA 回收、PCR反应产物纯化回收等 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
诺博莱德 微量DNA浓缩回收试剂盒 核酸提取
DNA Purification micro Kit微量 DNA 浓缩回收试剂盒
目录号:43016
产品内容:
产品组成 | 43016-100 |
Buffer BL | 5 ml |
Buffer DB | 40 ml |
Buffer WB | 13 ml |
Buffer EB | 10 ml |
microSpin Column With Collection Tubes | 100 套 |
自备试剂:
无水乙醇
保存条件:
室温(15 ~ 25℃)
产品简介:
本试剂盒为超微量DNA浓缩回收的专用试剂盒。适用于微量DNA的琼脂糖凝胶 DNA 回收、PCR反应产物纯化回收、酶切产物DNA片断纯化回收、探针标记后纯化回收、DNA样品浓缩等。使用本产品可回收100bp-5kb大小的DNA片段,回收率可达 85%-95%。该试剂盒操作简便,得到的DNA 片段可用于酶切、连接、测序等实验。
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
产品特点:
1. 特殊微量5μg离心柱设计可以最di5μl洗脱,保证了回收 DNA 的高浓度。
2. 特殊无垫圈离心柱的设计,最大限度减少了无液体残留和污染,保证了回收 DNA 的高纯度。
3. 快速:步骤少,操作简便,整个操作仅需 15 分钟。
注意事项:
1. Buffer BL 的加入能够改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和稳定性,消除高温潮湿或其他不良环境因素对吸附柱造成的影响。收到货后 2 个月内,不用做柱平衡。
2. 使用前请先检查Buffer BL、Buffer DB 是否出现浑浊,如有混浊现象,可在 37℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。
3. 切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对 DNA 造成损伤。
4. 回收率与初始 DNA 量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越小,回收率越低。
操作步骤:
第一次使用前,请先在 Buffer WB 中加入无水乙醇,并打对勾标记,加入体积请参照瓶上的标签。
一、从琼脂糖凝胶中回收DNA 片段
1. 柱平衡:向吸附柱中(吸附柱放入收集管中)加入 50 ul Buffer BL,12,000 rpm 离心 1 min,弃滤液,将吸附柱重新放回收集管中。(请使用当天处理过的柱子)
2. 切胶:在长波紫外灯下,用干净刀片将目的 DNA 条带切下,尽量切除不含 DNA 的凝胶。
3. 称重:将切下的含有目的 DNA 条带的凝胶,放入 1.5 ml 离心管中,称取凝胶重量(去除空管重量)。如果凝胶重量为 100mg,其体积可视为 100ul。
4. 溶胶:加入 3 倍体积 Buffer DB,56℃水浴,直到凝胶完quan溶解,期间颠倒混匀 2 次加速溶胶。
(如果凝胶浓度大于 2%,应加入 6 倍体积 Buffer DB。对于回收<100 bp 的小片段,可在凝胶完quan溶解后,再加入 1.5 倍胶块体积的异丙醇以提高回收率。)
5. 吸附:待溶液冷却至室温后加入吸附柱中,室温静置 1 min,然后 12,000 rpm 离心 30 sec,弃滤液。
(如果总体积超过 750 ul,可分 2 次将溶液加入同一离心吸附柱中)
6. 漂洗:加入 300 ul 漂洗液Buffer WB,12,000 rpm 离心 30 sec,弃滤液。
7. 二次漂洗:重复操作步骤 6。
8. 干燥:将吸附柱放回收集管中, 12,000 rpm 离心 2 min,甩干膜上残留的乙醇,防止其抑制下游反应。
9. 回收:将离心吸附柱置于一个新的 1.5 ml 离心管中,在微量吸附柱的膜中央加入 10 ul (5 ~ 25 ul)洗脱液Buffer EB,室温放置 1 min,12,000 rpm 离心 1 min。
(注意:为增加回收效率,可将洗脱液在 65℃预热,也可将得到的溶液重新加入到离心管中,室温放置 1 min,再次离心收集。)
微量DNA浓缩回收试剂盒 核酸提取