酸性磷酸酶(acid phosphatase，ACP)分布极广泛，遍布各种组织，主要存在于细胞的溶酶体内，所以常作为溶酶体标志酶。溶酶体外的酸性磷酸酶存在于内质网和胞质内。
抗酒石酸酸性磷酸酶染色试剂盒 酶类染色

NobleRyder G9270 抗酒石酸酸性磷酸酶染色试剂盒 Tartrate-Resistant Acid Phosphatase(TRAP) Stain Kit

产品货号：G9270

产品名称：抗酒石酸酸性磷酸酶染色试剂盒，Tartrate-Resistant Acid Phosphatase(TRAP) Stain Kit

产品规格：4*10ml/4*20ml

抗酒石酸酸性磷酸酶染色试剂盒 酶类染色

产品简介：

中文名称：抗酒石酸酸性磷酸酶染色试剂盒

英文名称：Tartrate-Resistant Acid Phosphatase(TRAP) Stain Kit

规格：4*10ml ; 4*20ml

储存条件：-20℃，避光保存，有效期3个月。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

NobleRyder G9270 抗酒石酸酸性磷酸酶染色试剂盒，Tartrate-Resistant Acid Phosphatase(TRAP) Stain Kit产品介绍

酸性磷酸酶(acid phosphatase，ACP)分布极广泛，遍布各种组织，主要存在于细胞的溶酶体内，所以常作为溶酶体标志酶。溶酶体外的酸性磷酸酶存在于内质网和胞质内。各种动物中的酸性磷酸酶各有不同，酸性磷酸酶的适宜pH为4.5-5.5。存在于正常人肺泡巨噬细胞和白血病人脾脏的抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resist n t acid phosphatase，TRAP)均在细胞滤泡中，并不是释放入血液。血液中的TRAP绝大多数来源于破骨细胞，因此可以通过测量血液中的TRAP了解破骨细胞的功能状态。

抗酒石酸酸性磷酸酶染色液以萘酚AS-BI为底物，在酸性pH下被酸性磷酸酶水解释放出磷酸和萘酚，萘酚与重氮盐偶联生成有色产物，定位于细胞质中，若细胞内的ACP有抗酒石酸的活性，则呈阳性反应。该染色液可用于新鲜血涂片、细胞涂片，亦可用于冰冻切片、石蜡切片。

自备材料：

蒸馏水、恒温箱、载玻片、光学显微镜

操作步骤：(仅供参考)

(一) 样本处理：

1、细胞涂片：取新鲜全血或骨髓制备涂片，推玻片于载玻片保持30度，置于血液或细胞滴液的正前方， 稍往后移与血液或细胞滴液接触使后者沿推片下缘散开，再匀速沿载玻片平面平稳向前滑动至均匀铺 开为止，自然晾干。

2、贴壁培养细胞、细胞爬片：吸去培养基，1×PBS清洗3-4次，沥去多余水分。取出细胞爬片。

3、冰冻切片：从冰箱取出放置恢复室温，浸入蒸馏水清洗1-2min，沥去多余水分。

4、石蜡切片：石蜡切片脱蜡5-10min，重复一次。无水乙醇5min，90%乙醇和70%乙醇各2min，蒸馏 水浸洗2min，沥去多余水分。

(二) 染色孵育：

1、使用2-8℃预冷的TRAP固定液固定30s-3min，多数情况下30-60s即可。

2、蒸馏水洗，沥去多余水分(不宜过分干燥)。

3、（切片处理）滴加TRAP孵育液覆盖切片，置于湿盒内37℃温箱孵育45-60min，蒸馏水洗。

4、（贴壁细胞）滴加 TRAP孵育液覆盖细胞，置于37℃温箱孵育45-60min，蒸馏水洗。

5、复染：苏mu素或甲基绿复染液染色2-3min。如选用苏mu素染色液复染，染色后须自来水返蓝10min 或1×PBS返蓝3-5min。

(三) 封片观察：

1、（切片处理）蒸馏水稍洗，沥去多余水分，滴加水性封片剂封片后镜检观察。

2、（贴壁细胞）蒸馏水稍洗，可带水或1×PBS镜下观察。

注意事项：

1、该染色试剂盒为酶活原位染色试剂盒，常用于破骨细胞细胞诱导培养后细胞鉴定和组织中特定细胞定位，反应底物和染料易失效，收到产品后建议第一时间根据说明书描述温度妥善保存。

2、试剂B2为偶氮染料储备液，有颗粒状悬浮物属正常现象不影响染色。如担心，预混合B1和B2可使 颗粒物wan全溶解，但需在2小时内使用完毕。

3、酶活易受多种因素影响导致衰减或消失。建议样本新鲜取材，使用预冷固定液在2-8℃冰箱固定，时间不宜超过24h。包埋时推荐使用低熔点蜡（52-56℃），避免热失活。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

抗酒石酸酸性磷酸酶染色试剂盒 酶类染色 

产品订购信息：

NobleRyder G9270 抗酒石酸酸性磷酸酶染色试剂盒，Tartrate-Resistant Acid Phosphatase(TRAP) Stain Kit 4*10ml/4*20ml