β-半乳糖苷酶染色试剂盒(β-Galactosidase Staining Kit)是一种基于衰老时SA-β-Gal (senescence-associated β-galactosidase)活性水平上调而对衰老细胞或组织进行染色检测的试剂盒。
β-半乳糖苷酶染色试剂盒 酶类染色

NobleRyder G9368 β-半乳糖苷酶染色试剂盒，Senescence-Associated β-Galactosidase（SA-β-Gal） Stain Kit

产品货号：G9368

产品名称：β-半乳糖苷酶染色试剂盒，Senescence-Associated β-Galactosidase（SA-β-Gal） Stain Kit

产品规格：100T

β-半乳糖苷酶染色试剂盒 酶类染色

产品简介：

中文名称：β-半乳糖苷酶染色试剂盒

英文名称：Senescence-Associated β-Galactosidase（SA-β-Gal） Stain Kit

规格：100T

储存条件：-20℃，避光保存，有效期1年。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

NobleRyder G9368 β-半乳糖苷酶染色试剂盒，Senescence-Associated β-Galactosidase（SA-β-Gal）Stain Kit产品介绍

β-半乳糖苷酶染色试剂盒(β-Galactosidase Staining Kit)是一种基于衰老时SA-β-Gal (senescence-associated β-galactosidase)活性水平上调而对衰老细胞或组织进行染色检测的试剂盒。在普通的光学显微镜下就可以观测到细胞或组织的衰老情况。本试剂盒可以用于培养细胞的衰老检测，也可以用于组织切片的衰老检测。β-半乳糖苷酶染色试剂盒以X-Gal为底物，在衰老特异性的β-半乳糖苷酶催化下会生成深蓝色产物，光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞或组织。本试剂盒仅染色衰老细胞，对衰老前的细胞(presenescent cells)、静止期细胞(quiescent cells)、永生细胞(immortal cells)或肿瘤细胞等不会染色。对于组织切片或组织块，可以检测的样品数量视样品的大小而定，对于普通的切片也至少足够检测100个样品，使用6孔板测定，足够测定100个样品。 

操作步骤：(仅供参考)

注意：配置染色工作液推荐使用聚丙烯(PP)容器，不能使用聚苯乙烯(PS)容器配制染色工作液。

染色过程中的37℃孵育不能在二氧化碳培养箱中进行，易造成假阳性染色。

(一)贴壁细胞染色：

1. 对于6孔板中培养的细胞，吸除细胞培养液，用PBS洗涤1次，加入1mlβ-Gal 固定液，室温固定15min。

对于其它类型的培养板，固定液及后续溶液的用量参照此比例进行操作。

2. 吸除细胞固定液，用1×PBS洗涤细胞3次，每次3min。（优选步骤见注意事项3）

3. 按照比例配置染色工作液。吸除β-Gal清洗液，每孔加入1ml染色工作液。

4. 37℃孵育过夜12-24h，可以用封板膜或保鲜膜封住6孔板防止蒸发。

5. 普通光学显微镜下观察。如不能及时观察计数，可以去除染色工作液，加入2mlPBS，2-8℃可以保存数天；或者加上水性明胶封片剂封片后，可以保存较长时间。

(二)悬浮细胞染色：

1. 离心收集细胞至1.5ml离心管内，用PBS洗涤1次，加入1mlβ-Gal 固定液，室温固定15min。固定时可以在摇床上缓慢摇动，以避免细胞结成团块。

2. 离心，吸除细胞固定液，用1×PBS洗涤细胞3次，每次3min。（优选步骤见注意事项3）

3. 按照比例配置染色工作液。离心，吸除β-Gal清洗液，每管加入0.5-1ml染色工作液。37℃孵育过夜12-24h。

4. 取部分染色后的细胞，滴加到载玻片上或6孔板内，普通光学显微镜下观察。如不能及时观察计数，可以离心，去除染色工作液，然后加入1mlPBS，2-8℃可以保存数天。如果离心，取细胞用于涂片，加上封片液封片后，2-8℃可以保存较长时间。

(三)组织切片染色：

1. 对于酶保护处理过的冷冻切片，直接按照以下步骤进行。（见注意事项4）

2. 滴加适当体积的β-Gal 固定液，以充分盖住组织为宜，室温固定不少于15min。

3. 用PBS浸泡洗涤组织3 次，每次不少于5min。（优选步骤见注意事项3）

4. 按照比例配置染色工作液。滴加适当量的染色工作液。

5. 37℃孵育过夜12-24h。建议使用湿盒防止挥发或把整个切片浸泡在染色工作液中。

6. 普通光学显微镜下观察。如不能及时观察，可使用水性明胶封片剂封片保存 。

注意事项：

1.    β-Gal 固定液有一定的腐蚀性和毒性，操作时请注意防护。

2.    β-半乳糖苷酶染色反应依赖于特定的pH条件，不能在二氧化碳培养箱中进行染色反应。用于细胞培 养的二氧化碳培养箱中较高浓度的二氧化碳会影响染色工作液的pH值，而导致染色失败。

3.    优选步骤，在滴加染色工作液之前使用试剂(E):β-Gal染色液C替代1×PBS进行清洗和孵育。

4.    半乳糖苷酶稳定性较差，在使用多聚甲醛固定或制备石蜡切片时极易灭活，建议制备速冻切片，或使 用酶保护型专用固定液：G2195-半乳糖苷酶定色剂进行固定和冰冻切片制备。组织浸于半乳糖苷酶定 色剂中可稳定酶活至少一周。

5.    配制染色工作液时需使用聚丙烯(PP)容器或玻璃容器，不宜使用聚苯乙烯(PS)容器。但染色时对容器 材质无要求，例如普通的6孔板就可以用作染色的容器。

6.    爬片或涂片如需长期保存可染色后蒸馏水洗2次，倾去多余液体晾干后中性树胶封片。

7.    为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

β-半乳糖苷酶染色试剂盒 酶类染色 

产品订购信息：

NobleRyder G9368 β-半乳糖苷酶染色试剂盒，Senescence-Associated β-Galactosidase（SA-β-Gal） Stain Kit 100T