核蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种原代或传代动物细胞和各种动物实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等动物组织中提取核蛋白和胞浆蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。制备的核蛋白和胞浆蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。本试剂盒含有的du特配方能够有效溶解细胞核膜组份。
冻存样本核蛋白提取试剂盒-常备现货

诺博莱德 冻存样本核蛋白提取试剂盒

 NobleRyder P5036 冻存样本核蛋白提取试剂盒

 产品货号：P5036

 产品名称：冻存样本核蛋白提取试剂盒

 产品规格：50T/100T

冻存样本核蛋白提取试剂盒-常备现货

 产品简介：

 中文名称：冻存样本核蛋白提取试剂盒

 规格：100T ; 50T

 储存条件：2-8℃，1 year

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

核蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种原代或传代动物细胞和各种动物实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等动物组织中提取核蛋白和胞浆蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。制备的核蛋白和胞浆蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。本试剂盒含有的du特配方能够有效溶解细胞核膜组份。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。本试剂盒提取的蛋白可用于WesternBlotting、转录活性分析、Gelshift凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。

适用样本：动物组织

注：

1. 蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。

2. 蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

3. 试剂拆封后请尽快使用完！

产品简介：

核蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种原代或传代动物细胞和各种动物实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等动物组织中提取核蛋白和胞浆蛋白。提取过程简单方便，可在 1 小时内完成。制备的核蛋白和胞浆蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。

本试剂盒含有的du特配方能够有效溶解细胞核膜组份。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。

本试剂盒提取的蛋白可用于 Western Blotting、转录活性分析、Gel shift 凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。

本试剂盒中不含有 EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。

本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。

自备试剂和仪器：

离心机、振荡器、涡旋混匀器、移液器、冰箱、冰盒，PBS 缓冲液、蛋白定量试剂盒，离心管、吸头、一次性手套

产品特点：

1. 使用方便，从细胞，组织中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。

2. 将蛋白提取的时间缩短至 30 分钟-1 小时。

3. 含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。

4. 紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。

5. 蛋白提取液含多种有效成分，可以充分释放胞浆蛋白、核蛋白，又可结合释出的蛋白防止沉淀。

6. 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含 6种独立的蛋白酶抑制剂 AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括si氨酸蛋白酶、半guang氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

使用方法：

一、使用注意事项：

1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

2. 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

3. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

4. 如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。

5. 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

6. Western 实验内参可以选用 Lamin A、Lamin B、TBP、Histon H3。

二、操作步骤

1. 提取液准备：

每200ul冷的蛋白提取液B中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物，充分混匀后置冰上备用。

【注】：

1) 根据需要处理的样品数量准备蛋白提取液，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。磷酸酶抑制剂可以一次加入。

2) 加过蛋白酶抑制剂的提取液一周内未使用完，再次使用前需要再次加入蛋白酶抑制剂。

3) 以下步骤中使用的蛋白提取液为此步配制好的含蛋白酶抑制剂的提取液。

2. 2、样本解冻后，取适量组织样本用手术jian刀尽可能剪碎，加冷 PBS，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。

【注】：

1) 细胞样本直接按下面的第四步骤开始操作。

3. 匀浆液在4℃，1000×g条件下离心3分钟，弃上清，收集沉淀。

4. 每20-40ul细胞沉淀体积中加入200ul冷的提取液A，高速涡旋振荡 15 秒或吹打混匀，置2-8℃条件振荡20-30分钟。

【注】：

1) 提取液A 处理后细胞体积应减少，否则延长提取液A 振荡处理时间。

2) 使用振荡器/摇床的较低转速，提取液能轻微晃动即可。

3) 没有振荡条件也可以不振荡，稍微延长提取液的处理时间，中间每隔几分钟用移液器吹打混匀即可。

4) 或者按每20-50mg 组织重量加200 μl 试剂A。

5. 在4℃，2000×g条件下离心10分钟，弃上清，收集沉淀。

6. 在沉淀中加入80-200ul冷的蛋白提取液B，高速涡旋振荡15秒。

【注】：

1) 提取液用量根据实验细胞数量情况调整，细胞数量多则多加。也可根据预实验时最终蛋白浓度实际情况调整。

2) 加提取液B 前，必须尽可能吸干提取液A。否则会影响核蛋白纯度。

3) 对核蛋白纯度要求较高时，也可以用PBS 将沉淀洗涤一次。PBS 重悬沉淀，2000×g 离心5 分钟后收集沉淀再加提取液B。

7. 置2-8℃条件振荡30-40分钟。

【注】：

1) 使用振荡器/摇床的较低转速，提取液能轻微晃动即可。

2) 没有振荡条件也可以不振荡，稍微延长提取液的处理时间，中间每隔几分钟用移液器吹打混匀即可。

3) 此步骤蛋白提取液处理产物中有时会出现少量透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的蛋白复合物。不检测和基因组DNA结合特别紧密的特定蛋白的情况下，可以直接离心取上清进行后续实验即可；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理，300w/10秒间隔10秒，超声3分钟，随后离心取上清用于后续实验。检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，不必进行超声处理。如果引入其他外源性蛋白质不影响下游实验的话，也可以加入DNase处理。

8. 在4℃，12000×g条件下离心10分钟。弃沉淀，收集上清。

9. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。

10. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

【注】：

1) 建议用BCA 法进行蛋白定量。

2) 蛋白样品-80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。

注意事项：

1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得优良实验效果。

2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。

5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻di清除残留清洁剂。

6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

冻存样本核蛋白提取试剂盒-常备现货

产品订购信息：

P5036  冻存样本核蛋白提取试剂盒  50T/100T