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品牌 | NobleRyder/诺博莱德 | 货号 | D9088 |
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规格 | 50T / 100T | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等实验 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
DNA琼脂糖凝胶回收试剂盒 质粒提取
NobleRyder D9088 DNA琼脂糖凝胶回收试剂盒 DNA Extraction Kit
产品货号:D9088
产品名称:DNA琼脂糖凝胶回收试剂盒 DNA Extraction Kit
英文名称:DNA Extraction Kit
产品规格:50T/100T
产品简介:
储存条件:RT,复检期1年
NobleRyderD9088 DNA琼脂糖凝胶回收试剂盒本试剂盒采用可以高效、专一结合DNA的硅基质材料和du特的缓冲液系统,从TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收DNA片段,同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。可回收100bp–10kb大小的片段,回收率大于80%(<100bp和>10kb 的DNA片段回收率为30-50%)。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等实验。
注意事项:
1、电泳时最好使用新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果,如下一步实验要求较高,则应尽量使用TAE电泳缓冲液。
2、切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。
3、回收<100bp及>10kb的DNA片段时,应加大溶胶液的体积,延长吸附和洗脱的时间。
4、回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越小,回收率越低。
5、如非指明,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
操作步骤(仅供参考):
*使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。
1.琼脂糖凝胶电泳后,将单一的目的 DNA 条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分),放入干净的离心管中,称取重量。
2.向胶块中加入 3 倍体积溶胶液(如果凝胶重为0.1g,其体积可视为 100μL,则加入 300μL溶胶液),50-55℃水浴放置10min,期间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解。
注意:溶胶时,如果溶胶液变为红色(正常情况下为淡黄色),可向含有 DNA 的胶溶液中加入10-30μL 3M 醋酸钠(pH5.2)将胶溶液调为淡黄色,否则将会影响DNA与吸附柱的结合,影响回收效率。
3.将上一步所得溶液加入一个吸附柱中(吸附柱放入收集管中),12000rpm离心30-60s,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放入收集管中。
注意:胶块wan全溶解后最好将胶溶液温度降至室温再上柱,因为吸附柱在较高温度时结合DNA的能力较弱。
4.向吸附柱中加入600μL漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
5.向吸附柱中加入600μL漂洗液,12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
6.12000rpm 离心 2min,尽量除去漂洗液。将吸附柱敞口置于室温或 50℃温箱放置数分钟,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,防止漂洗液中的乙醇影响后续的实验。
7.将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加适量经65℃水浴预热的洗脱液,室温放置2min,12000rpm离心1min。
注意:
1)为了增加回收效率,可将得到的洗脱液重新加入吸附柱中,12000rpm再次离心1min。
2)洗脱缓冲液体积不应少于30μL,体积过小影响回收效率。
3)洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5之间。
8.DNA 产物-20℃保存。
DNA琼脂糖凝胶回收试剂盒 质粒提取
产品订购信息
D9088 DNA琼脂糖凝胶回收试剂盒 DNA Extraction Kit 50T
D1198 DNA琼脂糖凝胶回收试剂盒 DNA Extraction Kit 100T