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KOD DNA Polymerase(含超纯dNTP )PCR相关
  • 产品型号:71516
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2025-04-23
  • 访  问  量:232
简要描述:

Taq DNA Polymerase的2倍,达到100-138bp/秒,可以在短时间内获得高产量的扩增产物,特别适合于高保真地扩增6kb以内的PCR 产物,扩增所得的DNA为平末端,可直接用于Blunt (平末端)载体克隆(Cat#V116、V117),也可用于基因克隆、表达及突变分析等分子生物学实验。
KOD DNA Polymerase(含超纯dNTP )PCR相关

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产品详情
品牌NobleRyder/诺博莱德货号71516
规格250U/500U供货周期现货
主要用途用于基因克隆、表达及突变分析等分子生物学实验。应用领域环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药

诺博莱德 KOD DNA Polymerase(含超纯dNTP )PCR相关


KOD DNA Polymerase (含超纯 dNTP)


目录号:71516

产品内容

产品成份

71516-250

71516-1000

KOD DNA Polymerase(5U/µl)

250 U

500 U

10× KOD Buffer

1 ml

1 ml

SuperPure dNTP mix(10 mM)

0.1 ml

0.2 ml

保存条件

-20℃保存,有效期 2 年。


具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准


产品简介

KOD DNA Polymerase 是从克隆有Thermococcus Kodakaraensis DNA聚合酶基因的质粒在大肠杆菌中经诱导表达分离纯化而来。该酶所具有的超qiang3’→ 5’外切酶活性使得其保真性比Pfu DNA Polymerase 更高,保真性是Taq DNA Polymerase的80倍,同时具有合成速度快的特点,聚合速度约为普通Pfu DNA Polymerase的5倍,Taq DNA Polymerase的2倍,达到100-138bp/秒,可以在短时间内获得高产量的扩增产物,特别适合于高保真地扩增6kb以内的PCR 产物,扩增所得的DNA为平末端,可直接用于Blunt (平末端)载体克隆(Cat#V116、V117),也可用于基因克隆、表达及突变分析等分子生物学实验。

活性单位:

KOD DNA Polymerase 活性定义为在 75°C 活性测定条件下,在 30 min内摄入 10nmoles 的 dNTPs 使成为酸性不溶物时所需要酶的活性定义为1U。

质量控制:

SDS-PAGE 检测纯度大于 99%,经检测无外源核酸酶活性;PCR 方法检测无宿主残余 DNA,能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显活性改变。

适用范围:

用于DNA的高保真扩增,如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变分析(SNP)和平末端补平等。

注意事项:

高保真KOD对于dNTP纯度要求很高,因此建议用本酶配套的超纯dNTP mix。

KOD DNA Polymerase的使用说明:

一、配制 PCR 反应体系:(于冰上配制)

Component

50 μl Reaction

终浓度

Template DNA

as required

10pg-0.5μg

Forward Primer (10 μM)

1 μl

0.2 μM

Reverse Primer (10 μM)

1 μl

0.2 μM

10× KOD Buffer

5 μl

SuperPure dNTP mix(10 mM)

1 μ

0.2 mM

KOD DNA polymerase(5U/μl)

0.25-0.5 μl( 1.25-2.5 U)


ddH2O

up to 50 μl


参考模板用量(50 μl 反应体系):

质粒:5-20 ng;细菌基因组:10-100 ng;人类基因组:50-100 ng;cDNA:1-2 μl 。

注意:用 ddH2O 补足反应体系(体积)至 50 μl。实际操作中,首先要计算好需要补加ddH2O 的量以后,建议先加水,然后按上述顺序添加其它成分,最后添加 KOD DNA Polymerase。充分混匀后,离心数秒使反应混合物沉到管底,然后将反应管置于 PCR 仪中进行扩增。

二、设置 PCR 循环条件:(请根据实际情况适当调整)

Step

Temperature

Time

Cycle Number

Initial denaturation

94℃

3 minutes


Denaturation

94℃

20-30 seconds

30-35 cycles

Annealing

50-60℃

20-30 seconds

Extension

72℃

1-4kb / minute

Final Extension

72℃

5 minutes



4-8℃

Hold


注意:一般情况下,Annealing Temperature = Tm - 5°C

如果扩增片段小于 4 kb,建议 KOD 酶的延伸速度为 1kb / 15 sec;

如果扩增片段大于 4 kb,建议延伸速度为 1kb / 20-30 sec。

三、结果检测:反应结束后取 5 µl 反应产物,琼脂糖凝胶电泳检测。


KOD DNA Polymerase(含超纯dNTP )PCR相关

北京诺博莱德科技有限公司始创于2012年,总部位于北京海淀区,专注于科研生物领域,是一家研发、销售和服务于一体的企业。公司秉承“诚信为本,博采众长"的发展理念,致力于为科研工作者提供高质量的生物产品和服务。

诺博莱德的产品覆盖面广泛,包括以下

生化试剂:抗生素、蛋白质、染色剂、细胞培养基、缓冲试剂、对照品、标准品、磁珠、维生素、酶和辅酶、分离试剂、表面活性试剂、碳水化合物;

即用型试剂:常规试剂溶液、即用型染色液、免疫学试剂、细胞生物学、分子生物学、检测试剂盒、细胞分离液人或其他动物细胞、荧光定量、蛋白酶系列;

通用耗材:超滤离心管、吸头/盒、离心管/盒、封板膜、PCR耗材、滤纸、口罩手套、冷冻存管/盒、培养板/皿/瓶、酶标条/板、巴氏吸管、载玻片、盖玻片、包埋/盒/模具、封片剂、刀片、石蜡、印迹膜、蓝盖瓶、研磨器材、透析袋/夹子、血凝板、记号笔、注射器、加样槽、取样杯、细胞筛网、细胞刮刀/铲、单道多道手动自动移液器/支架、防卷板等产品被国内科研工作者广泛应用。



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