适用于从动物组织、培养细胞中快速提取高质量的基因组DNA。
本试剂盒采用独te的裂解液，利用硅胶膜特异吸附DNA，无需酚氯仿等 有毒试剂，也无需进行耗时的醇类沉淀，最大限度的去除蛋白及其他抑制性 杂质，得到基因组DNA，无蛋白、核酸酶污染，可直接进行PCR、酶切和杂 交等相关分子生物学实验。
组织/细胞基因组DNA快速提取试剂盒

诺博莱德 组织/细胞基因组DNA快速提取试剂盒

FlashPure Tissue/Cell Genomic DNA Kit动物组织/细胞基因组DNA提qu试剂盒（离心柱型）

目录号:40017

产品内容：

自备试剂:

  无水乙醇，RNaseA（可选）

保存条件:

  室温（15~25℃）

  蛋白酶K，室温可保存6个月，4℃保存12个月，- 20℃保存2年。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

产品简介:

  适用于从动物组织、培养细胞中快速提取高质量的基因组DNA。

  本试剂盒采用独te的裂解液，利用硅胶膜特异吸附DNA，无需酚氯仿等 有毒试剂，也无需进行耗时的醇类沉淀，最大限度的去除蛋白及其他抑制性 杂质，得到基因组DNA，无蛋白、核酸酶污染，可直接进行PCR、酶切和杂 交等相关分子生物学实验。

产品特点:

1.    简便快速：30 min内可获得高纯度的基因组DNA。

2.   安全无毒：无需ben酚/氯仿抽提。

3.   高纯：OD260/280=1.7～1.9，长度可达 30～50 kb，可直接进行PCR、酶切和杂交等分子生物学实验。

注意事项:

1.    如果裂解液TL、结合液CB、抑制物去除液IR有沉淀析出，可在37℃水浴 溶解，摇匀后使用。

2.   开始实验前将需要的水浴先预热到70℃备用。

3.   洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使 用水洗脱，但应该确保批pH大于7.5，pH过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA应该保存在－20℃。DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影响下游 酶切反应，使用时可以适当稀释。

操作步骤:

第一次使用前，请先在漂洗液WB中加入指ding量无水乙醇，详见瓶身的标签。

提示：所有离心步骤必须在室温（15~25℃）下进行。

1.    柱平衡：向吸附柱的膜中央（吸附柱放入收集管中）加入 100μl 平衡液，12,000rpm 离心1 min，弃滤液，将吸附柱重新放回收集管中。（请使用当天处理过的柱子）

2.材料处理：

a. 动物组织

将动物组织在液氮中研磨成细粉（或者用解剖dao切成小碎块），取约25mg转入1.5 ml离心管中，加入180μl裂解液TL，再加入20μl蛋白酶K溶液，振荡至彻di悬浮，56℃水浴1~3小时，直至组织完quan消化溶解。

推荐样本投入量：动物组织≤25 mg，动物脾脏≤10 mg。

鼠尾样本投入量：大鼠尾巴最大用量为0.6 cm长片段，小鼠鼠尾巴最大用量为1.2cm长片段，并将裂解时间延长至6-8小时。

注意：水浴过程中，每10分钟颠倒混匀一次，可促进细胞裂解。

b.    培养细胞

① 105~106悬浮细胞到一个1.5 ml离心管；对于贴壁细胞，应该先用胰蛋bai酶消化后吹打下来收集。

② 13,000rpm离心10 sec，吸弃上清，留下细胞团和大约10~20μl残留的液体。

③ 加入200 μl 1× PBS，振荡至细胞充分悬浮，洗涤细胞去除杂质，13, 000 rpm离心10sec，完quan吸弃上清。

④再次加入180μl1×PBS，振荡混匀，使细胞彻di悬浮。

⑤ 加入20μl蛋白酶K溶液，充分混匀。

3.（可选步骤）加入5μl RNase A (100mg/ml)溶液，振荡混匀，室温 放置5 ~ 10min。

4.加入200μl结合液CB，充分振荡混匀，70℃水浴或金属浴处理10 min。

5.冷却后加100μl无水乙醇(或异丙醇)，充分振荡混匀，此时可能会出现絮状沉淀，短暂离心以去除管盖内壁水珠。

6.    将所得溶液和絮状沉淀加入一个DNA吸附柱中，（吸附柱放入收集管中）13,000rpm离心1 min，DNA被吸附在膜上，倒弃滤液。

7. 加入500μl抑制物去除IR，13,000rpm离心30sec，倒弃滤液。

8.    加入600μl漂洗液WB（请检查是否已加入无水乙醇），13,000rpm离心30 sec，倒弃滤液。

9.重复步骤9一遍。

10.将DNA吸附柱放回空收集管中，13,000rpm离心2min，尽量除去漂洗液，以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。

11.取出DNA吸附柱，放入一个干净的1.5 ml离心管中，向吸附膜的中央加入100μl洗脱缓冲液EB（洗脱缓冲液事先在80~100℃水浴中预 热可以提高产量）， 室温放置3~5min，13,000rpm离心1min。

12.DNA可以存放在2~8℃，如果要长时间存放，可以放置在-20℃。

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