本试剂盒是同类产品中适应性最guang泛，不但可以提取小麦、玉米、水稻、大豆、番茄、烟草、拟南芥等简单植物，也可以提取茶树叶片、棉花叶片、葡萄叶片、杨树叶片、番薯叶片、花生叶片、香蕉叶片、荔枝叶片、白松叶片等多糖多酚含量一般的植物。
通用型植物总RNA提取试剂盒(含DNase I )

诺博莱德 通用型植物总RNA提取试剂盒(含DNase I )

Universal Plant Total RNA Mini Kit通用型植物总 RNA 提取试剂盒（含 DNase I）

目录号：91512

产品内容

自备试剂

无水乙醇

保存条件

室温（15 ~ 25℃）下，存放 12 个月，不影响使用效果。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

产品简介

适用于提取绝大多数植物根、茎、叶、花的总RNA，配有DNase I，在RNA吸附膜上消化gDNA，得到的RNA可直接用于RT，RT-PCR，RT-qPCR，普通转录组测序、RACE等。

本试剂盒是同类产品中适应性最guang泛，不但可以提取小麦、玉米、水稻、大豆、番茄、烟草、拟南芥等简单植物，也可以提取茶树叶片、棉花叶片、葡萄叶片、杨树叶片、番薯叶片、花生叶片、香蕉叶片、荔枝叶片、白松叶片等多糖多酚含量一般的植物。

如果遇到果实、种子、中草药，例如多糖多酚巨高的作物种子（小麦/玉米/大豆/水稻）、葡萄果实、蓝莓果实、百合鳞茎、土豆块茎，或者次级代谢产物巨丰富的葛根、虎杖、雪莲等药用植物，请选择果实种子总RNA提取试剂盒(Cat#91512-50)。

产品特点

1. 无毒：免氯仿、免β-巯基乙醇！

2. 高质：28s/18s=2:1，OD260/280=2.0～2.2！

3. 高效：提取全过程仅需 30 min！

操作步骤

第一次使用前请先在漂洗液 RW 中加入指ding量无水乙醇，详见瓶身的标签。

提示：所有离心步骤必须在室温（15~25℃）下进行。

1. 材料处理：

a．在液氮中研磨适量植物组织成细粉，取≤50mg 细粉加入 550 μl 裂解液 RLA，剧烈涡旋震荡30sec，充分混匀。

冬天气温低， 37℃摇床放置 3 min，可增强裂解效果，提高产量

b．将裂解物 13,000 rpm 离心 5~10 min，沉淀不能裂解的碎片。

注意：使用 1ml 裂解液 RLA 去裂解≤100 mg 样品，RNA 产量会翻倍。

2. 小心吸取上清（约 480 μl，注意不要吸到沉淀）转入一个新的离心管中，加入 0.5 倍体积（约 240 μl）的无水乙醇, 吹打混匀。

3. 将≤750μl 上清混合液加入 RNA 吸附柱中，13,000 rpm 离心 2 min，倒弃滤液。此时，RNA 被吸附在膜上。重复此过程，直到溶液全部上柱。

4. 加入 350 μl 去蛋白液 RW1，室温放置 1min，13,000 rpm 离心 30 sec，倒弃滤液。

5. DNase I 工作液配制：取 45μl DNase Buffer 和 5μl DNase I 至新的RNase-Free 离心管中，轻轻吹打混匀。（处理多个样品，按照比例放大）

6. 向 RNA 吸附膜中央加入 50μl 的 DNase I 工作液，室温放置 15 min。

7. 加入 350μl 去蛋白液 RW1，13,000 rpm 离心 30 sec，倒弃滤液。

8. 加入 500μl 漂洗液 RW，13,000 rpm 离心 30 sec，倒弃滤液。

9. 重复步骤 8 一次。

10. 将 RNA 吸附柱放回空收集管中，13,000 rpm 离心 2 min，除去膜上残留的乙醇。

11. 取出 RNA 吸附柱，放入 RNase-free1.5 ml 离心管中，向 RNA 吸附膜的中央部位悬空滴加 30-50μl RNase-free H2O，室温放置 1 min，13,000 rpm 离心 1 min。

12. 提取的总 RNA，可直接用于下游实验，或于-70℃保存，以免降解。

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附录：

一、液氮研磨（自动研磨仪）—— 适用于各种样本

a. 把研磨模块也丢到液氮中预冷，直到没有气泡冒出视为预冷完毕。

b. 在2.0ml液氮研磨管中放入 3 mm 钢珠 3 粒，放进≤50 mg 样本，投入液氮中预冷。

c. 把预冷好的离心管插入研磨模块中，放进研磨仪，设置 55 个频率， 震荡 30~60 sec。（以北京赫得京 N9548 为例）

d. 研磨完成后，马上加 550 μl 裂解液 RLA，剧烈涡旋 30 sec，混匀。

e. 将裂解物 13,000 rpm 离心 5~10 min，沉淀不能裂解的碎片。

二、免液氮直接研磨（自动研磨仪）—— 适用于新鲜样本

a. 在 2.0 ml 液氮研磨管中加入 5 mm 钢珠 1 粒，加 1 ml 裂解液 RLA，放进≤100 mg 样本，设置 60 个频率，震荡 2 min。

b. 将裂解物 13,000 rpm 离心 5~10 min，沉淀不能裂解的碎片。

通用型植物总RNA提取试剂盒(含DNase I )