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品牌 | NobleRyder/诺博莱德 | 货号 | 91019 |
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规格 | 50次 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 用于提取绝大多数植物根、茎、叶、花的总RNA | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
诺博莱德 植物总RNA提取试剂盒
植物总 RNA 提取试剂盒FlashPure Plant Total RNA Mini Kit
目录号:91019
产品内容
产品成份 | 91019-50(50 次) |
裂解液 PRL | 50 ml |
糖酚去除剂 PAD | 5 ml |
去蛋白液 RW1 | 40 ml |
漂洗液 RW | 10 ml(需加入指ding量无水乙醇) |
RNase-Free H2O | 10 ml |
RNA 吸附柱和收集管 | 50 套 |
RNase-Free 1.5ml 离心管 | 50 支 |
RNase-Free 2.0 ml 液氮研磨管 | 50 支 |
保存温度
室温(15 ~ 25℃)保存,有效期 12 个月。
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
产品简介
适用于提取绝大多数植物根、茎、叶、花的总RNA,RNA可直接用于RT, RT-PCR,RT-qPCR,RACE,普通转录组测序等。
本试剂盒是同类产品中适应性最guang泛,不但可以提取小麦、玉米、水稻、大豆、番茄、烟草、拟南芥等简单植物,也可以提取茶树叶片、棉花叶片、葡萄叶片、杨树叶片、番薯叶片、花生叶片、香蕉叶片、荔枝叶片、白松叶片等多糖多酚含量一般的植物。
如果遇到果实、种子、中草药,例如:多糖多酚巨高的作物种子(小麦/玉米/大豆/水稻)、葡萄果实、蓝莓果实、百合鳞茎、土豆块茎;或者次级代谢产物巨丰富的葛根、虎杖、雪莲等药用植物,请选择R513-果实种子总RNA提取试剂盒。
产品特点
1. 无毒:免氯仿、免β-巯基乙醇!
2. 高质:28s/18s=2:1,OD260/280=2.0~2.2!
3. 高效:提取全过程仅需 20 分钟!
注意事项
a. 自备试剂:无水乙醇。
b. 提取过程使用 RNase-Free 的吸头;研钵用水彻di洗净,烘箱烘干即可;
c. 样品加入裂解液 PRL 匀浆后,可在–80℃保存一个月以上。
d. 取 RNA 样本时,把新鲜组织样本浸入 RNAsafe ( RNA 样品保存液, 91115-100 ) 中,可在 37℃保存一天,在 25℃保存一周,在 4℃保存一个月,在-20℃或者–80℃长期保存。
操作步骤
提示:所有离心步骤必须在室温(15 ~37℃)下进行。
第一次使用前,请先在漂洗液 RW 中加入无水乙醇,加入体积详见标签
1. 材料处理:
a.取 500 μl 裂解液 PRL,转入 1.5 ml 离心管中,再加入 50 μl 糖酚去除剂 PAD,混匀备用。
注意:对于幼嫩的农作物叶片等简单样本,不加糖酚去除剂 PAD,RNA
的产量可能会提高一些。
b.液氮中研磨适量植物组织成细粉,取≤50 mg 细粉转入上述装有裂解
液 PRL 的 1.5 ml 离心管中,剧烈涡旋震荡 30 sec,充分混匀。
(冬天气温低,37℃摇床振荡 3 min,可增强裂解效果,提高产量)
c. 将裂解物 13,000 rpm 离心 5-10 分钟,沉淀不能裂解的碎片。
注意:使用 1 ml 的裂解液 PRL 和 100 μl 糖酚去除剂去裂解 100 mg 样品,RNA 产量会翻倍。
2. 小心吸取上清(一般 480 μl,注意不要吸到沉淀)转入一个新的离心管中,加入 0.5 倍上清体积的无水乙醇(例如:480 μl 上清,加入 240 μl无水乙醇),此时可能出来沉淀,用移液器吹打混匀,不需要离心。
3. 转移上清混合液至 RNA 吸附柱中,13,000 rpm 离心 2 min,倒弃滤液。
注:吸附柱的容积为 750 μl,如果混合液超过此体积,请分两次上柱。
4. 加入700 μl 去蛋白液RW1,室温放置1min , 13,000 rpm离心30 sec,倒弃滤液。
5. 加入 500 μl 漂洗液 RW, 13,000 rpm 离心 30 sec,倒弃滤液。
6. 重复步骤 5。
7. 将 RNA 吸附柱放回空收集管中,13,000 rpm 离心 2 min,除去吸附膜上残留的乙醇。
8. 取出 RNA 吸附柱,放入 1.5 ml RNase-free 离心管中,向 RNA 吸附膜的中央悬空滴加 30~50 μl 的 RNase-free H2O,室温放置 1 min,13,000 rpm 离心 1 min。
9. 提取的 RNA 可直接用于下游实验,或于-70℃保存,避免 RNA 降解。
附录:
一、免液氮直接研磨(自动研磨仪)——适用于新鲜样本
a. 在2.0ml 液氮研磨管中加入4 mm两粒,加600μl裂解液 ARL,
放进20 mg左右的样本,设置65个频率,震荡2 min。
b. 将裂解物13,000 rpm 离心3 min,沉淀不能裂解的碎片。
二、液氮研磨(自动研磨仪):
a. 把研磨模块丢到液氮中预冷,直到没有气泡冒出视为预冷完毕。
b. 在2.0 ml液氮研磨管中放入3mm 钢珠3粒,放进20-30mg样本,投入液氮中预冷。
c. 把预冷好的离心管插入研磨模块中,放进研磨仪,设置 55 个频率, 震荡 30~60 sec。(以北京赫得研磨仪——京 N9548 为例)
d. 研磨完成后,马上加600μl裂解液ARL,剧烈涡旋振荡,充分混匀。
e. 将裂解物 13,000 rpm 离心 3 min,沉淀不能裂解的碎片。
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