适用于快速提取各种动物组织、细胞、昆虫的总RNA，RNA可直接用于RT，RT-PCR，RT-qPCR，普通转录组测序、RACE等。
动物组织/细胞/昆虫总RNA快速提取试剂盒

动物组织/细胞/昆虫总RNA快速提取试剂盒 

FlashPure Tissue/Cell/Insect Total RNA Mini Kit动物组织/细胞/昆虫总 RNA 提取试剂盒 

目录号：91017

产品内容

自备试剂

无水乙醇

保存条件

室温（15 ~ 25℃）下，存放 12 个月，不影响使用效果。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

产品简介

适用于快速提取各种动物组织、细胞、昆虫的总RNA，RNA可直接用于RT，RT-PCR，RT-qPCR，普通转录组测序、RACE等。

产品特点

1. 无毒：免氯仿、免β-巯基乙醇！

2. 高质：28s/18s=2:1，OD260/280=2.0～2.2！

3. 高效：提取全过程仅需 20min！

操作步骤

提示：

第一次使用前，请先在漂洗液 RW 和 70%乙醇中加入指ding量无水乙醇。

所有离心步骤均需要在室温（15 ~37℃）下进行。

1. 动物组织、昆虫

a. 电动匀浆：取新鲜组织 10~20 mg 加入 350 μl 的裂解液 ARL，电动匀浆，直到无明显组织块即可。

b. 液氮研磨：转移 350 μl 裂解液 ARL 至 1.5 ml 离心管中。液氮研磨组织成细粉，取 10~20 mg 组织细粉转入装有裂解液的 1.5ml 离心管中，剧烈涡旋振荡，充分裂解。

( 注意：裂解 20-30 mg 动物组织，需要加入 600μl 裂解液 ARL )

c. 将匀浆后裂解物 13,000 rpm 离心 3 min，转移上清至新的离心管中。

d. 下接步骤 3。

2. 细胞

a. 悬浮细胞：离心收集细胞，加350μl裂解液ARL（<5x106 细胞）或600μl裂解液ARL（5x106-1x107 细胞），吹打混匀，剧烈涡旋振荡，充分混匀，裂解细胞。

b. 贴壁细胞：不需要消化，彻di吸干培养液后，直接加裂解液 ARL，反复吹打细胞，帮助裂解；细胞培养瓶要先用胰蛋bai酶消化后离心收集细胞，然后加入裂解液 ARL，吹打混匀，剧烈涡旋振荡 20 sec，充分裂解。

（< 5x106细胞加 350 μl裂解液 ARL ；5x106-1x107细胞加 600 μl 裂解液 ARL）

（一般情况下，24 孔板、6 孔板、直径 3.5cm 的培养皿，每孔加 350 μl

裂解液 ARL，直径 6cm 以上的培养容器加 600 μl 裂解液 ARL）

c. 下接步骤 3。

3. 向上清或者裂解物中加入等体积（通常为 350 μl / 600 μl）的 70%乙醇，

吹打混匀。

4. 每次转移≤700 μl 混合物至一个 RNA 吸附柱中（吸附柱放入收集管中），

13,000 rpm 离心 30 sec，倒弃滤液，此时 RNA 被吸附在膜上。重复此

过程，直到溶液全部上柱。

5. 加入700μl 去蛋白液 RW1，室温放置 1 min，13,000 rpm 离心 30 sec，

倒弃滤液。

6.加入500μl漂洗液 RW，13,000 rpm 离心30sec，倒弃滤液。

7. 重复步骤 6。

8. 将 RNA 吸附柱放回收集管中，13,000 rpm 离心 2 min，除去膜上乙醇。

9. 取出RNA吸附柱，放入一个新的 1.5 ml RNase - free 离心管中，向吸附膜的中央部位悬空滴加30~50 μl RNase free H2O（事先在70-90℃水浴中加热可提高产量），室温放置 1 min，13,000 rpm 离心 1 min。

10.提取的RNA可直接用于下游实验，或于-70℃保存，避免 RNA 降解。

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附录：

一、免液氮直接研磨（自动研磨仪）——适用于新鲜样本

a. 在2.0 ml液氮研磨管中加入4 mm两粒，加600μl裂解液ARL，放进20mg 左右的样本，设置65个频率，震荡2min。

b. 将裂解物 13,000 rpm 离心 3 min，沉淀不能裂解的碎片。

二、液氮研磨（自动研磨仪）:

a. 把研磨模块丢到液氮中预冷，直到没有气泡冒出视为预冷完毕。

b. 在 2.0 ml 液氮研磨管中放入 3mm 钢珠 3 粒，放进 20-30mg 样本，

投入液氮中预冷。

c. 把预冷好的离心管插入研磨模块中，放进研磨仪，设置 55 个频率，

震荡 30~60 sec。（以北京赫得研磨仪——京 N9548 为例）

d. 研磨完成后，马上加 600 μl 裂解液 ARL，剧烈涡旋振荡,充分混匀。

e. 将裂解物 13,000 rpm 离心 3 min，沉淀不能裂解的碎片。

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