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品牌 | NobleRyder/诺博莱德 | 货号 | RP9983 |
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规格 | 50T/100T | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应。 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
NobleRyder RP9983 通用反转录试剂盒(M-MLV,不含Taq酶) Universal RT-PCR Kit(M-MLV, free Taq polymerase)
产品货号:RP9983
产品名称:通用反转录试剂盒(M-MLV,不含Taq酶) Universal RT-PCR Kit(M-MLV, free Taq polymerase)
英文名称:Universal RT-PCR Kit(M-MLV, free Taq polymerase)
产品规格:50T/100T
通用反转录试剂盒M-MLV不含Taq酶 核酸检测
产品简介:
储存条件:Store at -20℃,1 year.
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
NobleRyder RP9983 通用反转录试剂盒(M-MLV,不含Taq酶)产品简介:
本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应。它采用M-MLV进行反转录反应,能够获得较长的反转录产物用于后续的PCR扩增和分子克隆实验。
本试剂盒中配置的酶为进口的酶。RT酶采用进口的M-MLV,所以cDNA更长,基因的信息保留得更完整!反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷,可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
注意事项:
1、 用于cDNA合成反应的相关试剂和耗材尽可能用DEPC进行处理,并在高压灭菌后使用。有些试剂不能高压灭菌时,首先用经过灭菌的器具、水等配制溶液后,再将溶液进行过滤除菌处理。
2、 试剂盒的各组分应在-20℃保存,避免反复冻融,有效期12个月。
3、 RNA样品要避免反复多次冻融,应使RNA在冰浴中处于融化状态。
操作步骤(仅供参考):
一、反转录反应
关于逆转录引物的选择 :
(1)如果模板为真核生物来源,建议用 Oligo(dT)16 , Oligo(dT)16可以与真核生物 mRNA 的 3’Poly A 尾配对,可获得高产量的全长 cDNA。(2)模板为原核生物 RNA 的反转录请选用 Random引物或者基因特异性引物。Random 引物适用于mRNA、tRNA和rRNA等所有RNA的反转录反应,对物种没有限制,病毒、细菌、植物、动物等都可使用。
1、在冰浴的无RNase的离心管中加入如下反应成分:
1-5μg 总 RNA或50-500ng mRNA
2μLOligo(dT)16或 2μLRandom 或 2 pmole 基因特异性引物
补RNase-free ddH2O 至 14.5μL
2、70℃保温5min后迅速在冰上冷却2min,简短离心收集反应液后加入以下各组分:
4μL5×M-MLVBuffer
1μLdNTPs
0.5μL RNasin
1μLM-MLV
3、42℃温浴60min,如果是用Random 引物,请先将离心管置25℃温浴10min,再42℃温浴60min。
4、95℃加热5min终止反应,置冰上进行后续实验或-20℃保存。
5、若用于后续PCR扩增,用RNase-freeddH2O将反应体系稀释到50μL,取2-5μL作为PCR反应模板。
注意事项:
1、用于cDNA合成反应的相关试剂和耗材尽可能用DEPC进行处理,并在高压灭菌后使用。有些试剂不能高压灭菌时,首先用经过灭菌的器具、水等配制溶液后,再将溶液进行过滤除菌处理。
2、试剂盒的各组分应在-20℃保存,避免反复冻融,有效期12个月。
3、RNA样品要避免反复多次冻融,应使RNA在冰浴中处于融化状态。
通用反转录试剂盒M-MLV不含Taq酶 核酸检测
产品订购信息:
RP9983 通用反转录试剂盒(M-MLV,不含Taq酶) Universal RT-PCR Kit(M-MLV, free Taq polymerase) 50T/100T