蛋白质条带的银染是基于蛋白质中各种基团（如琉基、碳基等）与银的结合，然后用还原剂如甲醛在碱性环境下使Ag+还原成银颗粒，可把蛋白电泳带染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝胶电泳染色。其灵敏度比考马斯亮蓝高，该产品整个过程操作简单，灵敏度高，能检测到10ng以下的蛋白条带。
PAGE凝胶银染试剂盒 凝胶染色

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NobleRyder  G5098  PAGE凝胶银染试剂盒,蛋白银染试剂盒 蛋白快速银染试剂盒,PAGE Gel Silver Staining Kit

产品货号：G5098

产品名称：PAGE凝胶银染试剂盒,蛋白银染试剂盒 蛋白快速银染试剂盒,PAGE Gel Silver Staining Kit

产品规格：1L

产品简介：

别名：蛋白银染试剂盒 蛋白快速银染试剂盒

英文名称：PAGE Gel Silver Staining Kit

中文名称：PAGE凝胶银染试剂盒

规格：1L

储存条件：RT，avoid light，1 year

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

产品介绍

 蛋白质条带的银染是基于蛋白质中各种基团（如琉基、碳基等）与银的结合，然后用还原剂如甲醛在碱性环境下使Ag+还原成银颗粒，可把蛋白电泳带染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝胶电泳染色。其灵敏度比考马斯亮蓝高，该产品整个过程操作简单，灵敏度高，能检测到10ng以下的蛋白条带。

操作步骤（仅供参考）:

一、      染色液配制(无水乙醇自备)

需要配制的染色液体积根据 PAGE 胶的大小而定，一般的 mini-PAGE 胶需要 20-30mL。配制用 的器皿清洗干净后用去离子水涮洗，染色液须用去离子水配制，现用现配。如果配制的溶液体积不 是 100mL，可以按比例改变各成分用量。

1. 固定液：取 40mL 无水乙醇，10mL 染色液 A 加去离子水至 100mL，混匀；

2. 敏化液： 取 30mL 无水乙醇，10mL 染色液 C 加去离子水至 100mL，混匀；

3. 银染液：称取 0.12g 试剂 E，用 50mL 去离子水溶解，加入 10ul 染色液 B 混匀，加去离子水 至 100mL 现用现配。

4. 显色液：10mL 显色液 D 和 30μL 染色液 B 加入去离子水至 100mL，混匀，现用现配。

5. 终止液：取 5mL 染色液 A 加去离子水稀释至 100mL，现用现配。

二、染色：

1. PAGE 电泳结束后，将 PAGE 蛋白胶转移至玻璃平皿或搪瓷盘中，用固定液固定 30min。

2. 将 PAGE 胶转移至敏化液中，使染液没过 PAGE 胶，室温作用 30min。可置于摇床上缓慢摇晃

3. 弃去敏化液，用去离子水漂洗三次，每次 10min。

4. 将 PAGE 胶转移至银染液中，使染液没过 PAGE 胶，室温摇晃 40min。

5. 将 PAGE 胶转移至显色液中，使显色液没过 PAGE 胶，室温摇晃，该显色一般在 10min右。

6. 再选择合适的时间进行终止，弃去显色液，加入终止液即可。最后可进行信号收集保存。

注意事项：

1. 银染主要出现在 PAGE 胶的表面，使用薄胶（0.5-0.75mm）可以提高灵敏度。

2. 对于考马斯亮蓝染色的 SDS-PAGE 胶，可用甲醇将胶漂洗后，继续进行银染。考染过程中 的乙酸会干扰银染，因此要确保将 PAGE 凝胶中残留的乙酸che底洗净。

3. 不同蛋白质对银染的反应是不一样的，尤其是碱性蛋白染色效果差。因此，不宜用银染测 定不同蛋白的比例。

4. 染色过程中，缓慢的振荡是必要的，一般选择 40-60 rpm.

5. 凝胶表面的裂纹多是由于压力、手印及表面干燥所致，所以全程中都应带手套操作。

6. PAGE 凝胶背景呈均一的黑色多是水中的杂质引起的，所以溶液的配制应使用电导率小于 1 μS 的去离子水。

7. 如果染色后有呈灰尘或烟雾状灰色或棕色的沉淀出现在凝胶表面，可能是在几步漂洗过程 中洗得不够che底，或是染色过程时温度太低。

8. 较深的银染背景多是丙烯酰胺中的杂质所致。

9. PAGE 胶中的甘油、尿素、gan氨酸、Triton X-100 和两性电解质这些物质会干扰银染。

10. 室温操作时，温度的波动往往会干扰银染的效果，恒温水浴可以解决这个问题。

11. 凭借戊二醛预处理可以使各种蛋白质的染色提高 40 倍。

12. 染色使用的玻璃器皿必须非常干净，用酸浸泡可以满足要求。

13. 银染应尽快照相，随着时间延长，蛋白条带会变浅，而背景会加深。

14. 银染容器zui理xiang的是玻璃平皿，其次是搪瓷盘和密胺塑料盘等。

15. 试剂如有沉淀析出，混匀溶解（可加热）后室温使用。

PAGE凝胶银染试剂盒 凝胶染色

产品订购信息：

NobleRyder  G5098  PAGE凝胶银染试剂盒,蛋白银染试剂盒 蛋白快速银染试剂盒,PAGE Gel Silver Staining Kit 1L