测定意义：GSH是细胞内最主要的抗氧化巯基物质，在抗氧化、蛋白质巯基保护和氨基酸跨膜运输等中具有重要作用。还原型与氧化型比值（GSH/GSSG）是细胞氧化还原状态的主要动态指标。因此，测定细胞内GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值，能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。
还原型谷胱gan肽GSH含量检测试剂盒 抗逆

NobleRyder BC9953还原型谷胱gan肽(GSH)含量检测试剂盒 Reduced Glutathione(GSH) Content Assay Kit

产品货号：BC9953

产品名称：还原型谷胱gan肽(GSH)含量检测试剂盒 Reduced Glutathione(GSH) Content Assay Kit

产品规格：100T/96S

还原型谷胱gan肽GSH含量检测试剂盒 抗逆

产品简介：

中文名称：还原型谷胱gan肽(GSH)含量检测试剂盒

英文名称：Reduced Glutathione(GSH) Content Assay Kit

别名：还原型谷胱gan肽试剂盒 GSH Kit 还原型谷胱gan肽（GSH）试剂盒 还原型谷胱gan肽（GSH）测试盒

规格：100T/96S

检测方法：微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader

储存条件：Store at 2-8℃，6 months

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

NobleRyder BC9953还原型谷胱gan肽(GSH)含量检测试剂盒 Reduced Glutathione(GSH) Content Assay Kit

测定意义：GSH是细胞内最主要的抗氧化巯基物质，在抗氧化、蛋白质巯基保护和氨基酸跨膜运输等中具有重要作用。还原型与氧化型比值（GSH/GSSG）是细胞氧化还原状态的主要动态指标。因此，测定细胞内GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值，能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。

测定原理：DTNB与GSH反应生成复合物，在412nm处有特征吸收峰；其吸光度与GSH含量成正比。

需要的仪器，耗材:低温离心机、水浴锅、可调节移液器、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸馏水。

产品说明:

谷胱gan肽是由谷an酸(Glu)、半胱an酸(Cys)和甘an酸(Gly)组成的天然三肽，是一种含巯基(-SH)的化合物，广泛存在于动物组织、植物组织、微生物和酵母中。谷胱gan肽能和5,5'-二硫代-双-(2-硝基苯甲酸)(5,5-dithiobis-2-nitrobenoicacid，DTNB)反应产生2-硝基-5-巯基苯甲酸和谷胱gan肽二硫化物(GSSG)。2-硝基-5-巯基苯甲酸为黄色产物，在波长412nm处具有最大光吸收。

技术指标:

最di检出限:3.763μg/mL

线性范围:12.5-400μg/mL

操作步骤:

一、样本处理(可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献)

1.组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织，加入ImL试剂一)进行冰浴匀浆(匀浆器/研钵提前放冰上预冷)。12000g，4℃离心10min，取上清液放置于4℃待测。若暂时不能完成测试可放于-80C保存(可保存3天)。

2.细菌、细胞:按照细胞数量(106个):试剂一体积(mL)为5~10:1的比例(建议5百万细胞加入ImL试剂一)，反复冻融2-3次(可在液氮中冻结、37C水浴中溶解)或者冰浴超声波破碎细胞(功率200w，超声3s,间隔10s，重复30次)，12000g，4℃离心10分钟，取上清置于冰上待测。若暂时不能完成测试可放于-80℃保存(可保存3天)。

3.血液处理

血浆:将收集的抗凝血于4℃，600g离心10分钟，吸取上层血浆到另一支试管中，加入等体积的试剂一，沸水浴5min(缠封口膜，防止爆盖)。之后12000g，4℃离心10分钟，将上清移入新的试管中放置于4C待测，若暂时不能完成测试可放于-80C保存(可保存3天)。

血细胞:将收集的抗凝血于4C，600g离心10分钟，弃去上层血浆用3倍体积的PBS清洗3次(用PBS重悬血细胞，600g离心10分钟)，加入等体积试剂一，沸水浴5min(缠封口膜，防止爆盖)。之后12000g，4℃离心10分钟，吸取上清放于4℃待测，若暂时不能完成测试可放于-80C保存(可保存3天)。

二、测定步骤

1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至412nm，分光光度计蒸馏水调零。

2、标准品的准备:吸取10mg/mL标准溶液,用蒸馏水稀释至300μg/mL、200μg/mL、100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL。

三、GSH含量计算

1.标准曲线的绘制

据标准管的浓度(x，μg/mL)和吸光度△A标准(y，△A标准)，建立标准曲线。根据标准曲线，将△A(y，△A)带入公式计算样本浓度(x，μg/mL).

2.GSH含量计算:

(1)按蛋白浓度计算

GSH含量(μg/mg prot)=xxV样+(V样xCpr) =x-Cpr

(2)按样本质量计算

GSH含量(μg/g质量) =xxV 样+(V 样+V 样总xW)=x+W

Solarbio

(3)按细胞/细菌数量计算

GSH含量(μg/106cell) =xxV 样÷(V 样÷V 样总xN)=x÷N

(4)按血浆(血细胞)体积计算

GSH含量(μg/mL)=2x

V样总:上清液总体积，1mL:V样:加入反应体系中上清液体积，20μL=0.02mL;W:样本质量，g:

Cpr:上清液蛋白质浓度，mg/mL;N:细胞/细菌数量，以106为单位计;2:稀释倍数，血浆(血细胞)体积被稀释一倍。

注意事项:

1、若不确定样本中GSH含量的高低，可稀释几个梯度后再进行测量。

2、因为试剂一中含有蛋白质沉淀剂，因此上清液不能月于蛋白浓度测定。如需测定蛋白含量，需另取组织。

3、如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。

还原型谷胱gan肽GSH含量检测试剂盒 抗逆 

产品订购信息：

BC9953还原型谷胱gan肽(GSH)含量检测试剂盒 Reduced Glutathione(GSH) Content Assay Kit 100T/96S