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品牌 | NobleRyder/诺博莱德 | 货号 | BC2568 |
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规格 | 50T/24S | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是最主要的H2O2清除酶 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
NobleRyder BC2568过氧化氢酶(CAT)活性检测试剂盒(钼酸铵法) Catalase (CAT) Activity Assay Kit (Ammonium Molybdate-Chromogenic Method)
产品货号:BC2568
产品名称:过氧化氢酶(CAT)活性检测试剂盒(钼酸铵法) Catalase (CAT) Activity Assay Kit (Ammonium Molybdate-Chromogenic Method)
产品规格:50T/24S
过氧化氢酶CAT活性检测试剂盒钼酸铵法抗逆
产品简介:
中文名称:过氧化氢酶(CAT)活性检测试剂盒(钼酸铵法)
英文名称:Catalase (CAT) Activity Assay Kit (Ammonium Molybdate-Chromogenic Method)
规格:50T/24S
检测方法:可见分光光度法 Spectrophotometer
储存条件:Store at 2-8℃,6 months
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
NobleRyder BC2568过氧化氢酶(CAT)活性检测试剂盒(钼酸铵法) Catalase (CAT) Activity Assay Kit (Ammonium Molybdate-Chromogenic Method)
产品说明:
CAT(EC 1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是最主要的H2O2清除酶,在活性氧清除系统中具有重要作用。
H2O2可与钼酸铵反应形成稳定的黄色复合物,在405nm处有强烈吸收峰,且其吸光值大小与过氧化氢浓度成
正比。通过测定反应体系中剩余的H2O2量,得出被CAT催化分解的H2O2量,进而反映CAT的活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、恒温水浴锅、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
1、细菌、细胞或组织样本的制备:
a、细菌或培养细胞:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清:按照每500万细菌或细胞加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率200W,超声3s,间隔9s,重复30次):8000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
b、组织:按照组织质量(g):提取液体积(V)=1:5~10(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样本:直接检测。
二、测定步骤
分光光度计预热30min以上,调节波长至405nm,蒸馏水调零。
1、测定前将20μmol/mL标准品与试剂一在25C水浴10min以上。
三、CAT活性计算
1、血清(浆)CAT活力的计算:
单位的定义:在25℃条件下,每mL血清(浆)每分钟催化1μmolH2O2降解定义为一个酶活力单位。
CAT(U/mL)= (△A÷△A标准)x20xV标准+V样+TxF=10x(△A+△A标准)xF
2、组织、细菌或细胞中CAT活力计算:
1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:在25℃条件下,每mg组织蛋白每分钟催化1μmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
CAT(U/mg prot)=(△A+△A标准)x20xV标准+(CprxV样) +TxF=10x(AA÷AA标准)÷CprxF
2)按样本质量计算:
单位的定义:在25℃条件下,每g组织每分钟催化1μmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
CAT(U/g质量)=(△A+△A标准)x20xV标准+(V 样+V 样总xW) +TxF=10x(△A+ΔA标准) ÷WxF
3)按细菌或细胞数量计算:
单位的定义:在25℃条件下,每1万个细菌或细胞每分钟催化1μmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
CAT(U/104cell)= (△A÷△A标准)x20xV标准+(V样+V样总x500)+TxF=0.02x(△A÷△A标准)xF
20:标准品浓度,20μmol/mL:V标准:加入标准品体积,0.3mL:V样:加入样本体积,0.06mL:T:反应时间,10min:F:样本稀释倍数:Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;V样总:加入提取液体积,1mL:W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
注意事项:
1.本试剂盒多给出25mL的提取液,供样本稀释使用。
2.如果反应液有大量气泡产生,将样本用提取液稀释后再进行测定。
3.如果样本量过多,为保证反应时间(25℃,10min)的准确性,建议分成若干批次检测,每批次检测均需配1-2个空白管与标准管。
4.当A测定小于0.12或者约等于A对照时,建议将样本用提取液稀释后再进行测定。
5.动物组织如肝脏、肾脏等酶活性较高样本,预实验建议将样本用提取液多个高倍稀释(如25倍、50倍、100倍等)试验后,再进行检测。
过氧化氢酶CAT活性检测试剂盒钼酸铵法抗逆
产品订购信息:
BC2568过氧化氢酶(CAT)活性检测试剂盒(钼酸铵法) Catalase (CAT) Activity Assay Kit (Ammonium Molybdate-Chromogenic Method) 50T/24S