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品牌 | NobleRyder/诺博莱德 | 货号 | BC8958 |
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规格 | 50T/24S | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 一种广泛存在于生物体内的金属酶,是重要的氧自由基清除剂 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
NobleRyder BC8958超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒 Superoxide Dismutase(SOD) Activity Assay Kit
产品货号:BC8958
产品名称:超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒 Superoxide Dismutase(SOD) Activity Assay Kit
产品规格:50T/24S
超氧化物歧化酶SOD活性检测试剂盒 抗逆
产品简介:
中文名称:超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒
英文名称:Superoxide Dismutase(SOD) Activity Assay Kit
规格:50T/24S
检测方法:可见分光光度法 Spectrophotometer
储存条件:Store at 2-8℃,6 months
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
NobleRyder BC8958超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒 Superoxide Dismutase(SOD) Activity Assay Kit
SOD(EC 1.15.1.1)是一种广泛存在于生物体内的金属酶,是重要的氧自由基清除剂,能催化超氧化物阴离子发生歧化作用,生成H2O2和O2。SOD不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是H2O2主要生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。
通过黄piao呤及黄piao呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-),O2-可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜,后者在560nm处有吸收;SOD可清除O2-,从而抑制了甲臜的形成;反应液蓝色越深,说明SOD活性愈低,反之活性越高。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
1.细菌或细胞样本:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清,按照细菌或细胞数量(10°个):提取液体积(mL)为500-1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率200W,超声3s,间隔10s,重复30次),8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2.组织样本:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5-10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆;8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3.血清(浆)样本:直接检测。
二、测定步骤
1.分光光度计预热30min以上,调节波长至560nm,蒸馏水调零。
2.临用前根据样本数量取部分试剂一、试剂三和试剂四工作液37°℃水浴5min 以上。
三、SOD活性计算
1、抑制百分率的计算:抑制百分率=(ΔA空白-△A测定)+△A空白x100%
尽量使样本的抑制百分率在30-70%范围内,越靠近50%越准确。如果计算出来的抑制百分率小于30%或大于70%,则通常需要调整加样量后重新测定。如果测定出来的抑制百分率偏高,则需适当稀释样本;如果测定出来的抑制百分率偏低,则需重新准备浓度比较高的待测样本或者提高操作表中样本体积,同时减少相同的蒸馏水体积。
2、SOD酶活性单位:在上述黄piao呤氧化酶偶联反应体系中抑制百分率为50%时,反应体系中的SOD酶活力定义为一个酶活力单位。
3、SOD酶活性计算:
(1)血清(浆)SOD活性(U/mL)=[抑制百分率+(1-抑制百分率)xV 反总]÷1mL÷V 样xF
=11.11x抑制百分率+(1-抑制百分率)xF
(2)组织、细菌或培养细胞SOD活力计算:
A.按样本蛋白浓度计算
SOD活性(U/mg prot)=[抑制百分率+(1-抑制百分率)xV 反总]+1mL+ (V 样xCpr) xF
=11.11x抑制百分率+(1-抑制百分率)÷CprxF
B.按样本质量计算
SOD活性(U/g质量)=[抑制百分率+(1-抑制百分率)xV 反总]+lmL+(WxV 样+V 样总)xF
=11.11x抑制百分率÷(1-抑制百分率)+WxF
C.按细菌或细胞数量计算
SOD活力(U/104cell)-[抑制百分率+(1-抑制百分率)xV 反总]+1mL+(NxV 样+V 样总)xF
=11.11x抑制百分率÷(1-抑制百分率)xF÷N
V反总:反应体系总体积,1mL:V样:加入反应体系中样本的体积,0.09mL;V样总:加入提取液体积,1mL:Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL:W:样本质量,g;N:细胞或细菌总数,以万计:F:样本稀释倍数:1mL:1mL反应体系。
注意事项:
1、样本和试剂二工作液使用时在冰上放置。
2、样本较多时,可按表格配制测定管工作液和对照管工作液(包含试剂一、(试剂二工作液)、试剂三、蒸馏水),试剂四工作液必须最后加入。
3、反应完成后,可能有沉淀生成,混匀后测定即可。
超氧化物歧化酶SOD活性检测试剂盒 抗逆
产品订购信息:
BC8958超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒 Superoxide Dismutase(SOD) Activity Assay Kit 50T/24S