β-巯基还原剂，蛋白酶抑制剂（100×），PMSF（100X）这几个试剂使用前先用掌上离心机进行离心。
酵母总蛋白提取试剂盒-常备现货

NobleRyder BC1568 酵母总蛋白提取试剂盒

产品货号：BC1568

产品名称：酵母总蛋白提取试剂盒

产品规格：50T/100T

酵母总蛋白提取试剂盒-常备现货

产品简介：

中文名称：酵母总蛋白提取试剂盒

规格：50T ; 100T

储存条件：-20℃，avoid light，1 year

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

NobleRyder BC1568 酵母总蛋白提取试剂盒

产品介绍

操作步骤（仅供参考）：

注：β-巯基还原剂，蛋白酶抑制剂（100×），PMSF（100X）这几个试剂使用前先用掌上离心机进行离心。

1、收集OD600=1.0 酵母菌体，4℃，12000rpm离心5min,弃去上清液。

2、将菌体称重，按照比例（50mg：500µL）向沉淀中加入500µL破壁溶液Ⅰ，重悬菌体，冰上孵 育5min。

3、4℃，12000rpm 离心2min，弃去上清，向沉淀中加入500µL破壁溶液Ⅱ，重悬菌体，冰上孵育 5min。

4、在500µL的裂解液中加入5µLPMSF，5µL蛋白酶抑制剂和12.5µLβ-巯基还原剂；混匀，放置 在冰上备用(根据实际用量准备适量裂解液），现用现配。

5、4℃，12000rpm 离心2min,弃去上清，向沉淀中加入500µL上述提前备好的裂解液重悬菌液。室 温震荡40min~60min，或者煮沸5min。

6、裂解结束后，4℃ ，12000rpm 离心 10min。收集上清用于后续实验。

注意事项:

1、裂解液在低温条件下可能会出现沉淀析出现象，37度水浴加热至沉淀wan全溶解再使用。

2、β-巯基还原剂低温状态下可能比较粘稠，可恢复室温后使用。

3、提取后的蛋白溶液中含有还原剂，如果要测浓度，请先沉淀蛋白，然后用PBS重新溶解蛋白后再进行测定，否则会影响结果。

4、按照每50mg湿重加500µL的破壁溶液和裂解液，菌体的量不能够过多,否则会使的菌体裂解不 充分。

5、裂解后的酵母菌蛋白液,应在-80℃的冰箱中保存。

6、裂解液中盐离子浓度较高，必要时可除盐后使用。

7、如果提取磷酸化蛋白，需要加入磷酸酶抑制剂。

8、本试剂只能够用于体外实验科研实验，不能够用于临床、治疗和动物体内实验等，由此产生的后果，概不承担责任。

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产品订购信息：

NobleRyder BC1568 酵母总蛋白提取试剂盒 50T/100T