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品牌 | NobleRyder/诺博莱德 | 货号 | M0128 |
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规格 | 5mL/100ml | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 一种弱阴离子交换磁珠,具有快速的磁响应性丰富的离子交换能力和ji高的蛋白结合能力 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
NobleRyderM0128 DEAE磁珠 Magrose DEAE
DEAE磁珠 Magrose DEAE 蛋白纯化磁珠
产品货号:M0128
产品名称:DEAE磁珠 Magrose DEAE
产品规格:5mL/100ml
产品简介:
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
NobleRyderM0128 DEAE磁珠 Magrose DEAE
NobleRyderM0128 DEAE磁珠 Magrose DEAE是一种弱阴离子交换磁珠,具有快速的磁响应性、丰富的离子交换能力和ji高的蛋白结合能力。离子交换配基为二乙an乙基(diethylaminoethyl,DEAE),该配基在 pH3-12的工作范围内仍然能够保持稳定的高蛋白结合能力。
与传统柱层析纯化方式相比,MagroseDEAE 磁珠无需对粗蛋白样品进行预处理(如:反复繁琐的离心,费时费力的过滤操作),此外,无需控制流速及柱压,不需要昂贵的层析设备。对于熟练的操作者来说,在很短时间内就能完成高纯度目的蛋白的提取,且能轻松实现多个样品的平行处理,实现高通量的蛋白纯化。
产品优势
1. 磁响应速度快,减少操作时间
2. 磁珠具有良好的分散性和重悬性,提高操作的便捷性
3. 配基具有良好的物理化学稳定性,提高了实验结果的可靠性及可重复性
操作流程(以纯化含 BSA 蛋白样品为例)
1. 磁珠预处理(平衡):将MagroseDEAE 磁珠漩涡振荡 30s,使磁珠充分重悬;取一定量的 10%(v/v)磁珠悬液置于 50mL 离心管中。对磁珠悬液进行磁性分离,弃上清液,加入 20mL 平衡缓冲液洗涤磁珠 3 次,每次垂直混合2min。
注:为了获得目标蛋白的最大回收率,实验者需要加入过量的MagroseDEAE磁珠,一般大于蛋白结合量的20%即可。对于含较低丰度目标蛋白的样品中,磁珠对目标蛋白的回收率会有所降低,因此需要继续增大磁珠的用量;
2. 蛋白吸附:将预处理的磁珠加入含 BSA 蛋白的样品溶液中,漩涡振荡 30s,置于垂直混合仪混匀30~60min,使样品和磁珠充分接触并吸附,然后进行磁性分离,移弃上清液。
注:为了更有效率的吸附结合物质,平衡缓冲液最好含有较低的离子强度,选择的 pH 值应该至少与目标蛋白的等电点相差一个 pH 单位,选定的盐缓冲液 pH 波动在 0.5pH 以内。目标蛋白与磁珠的吸附时间与蛋白的本身属性有关
3.磁珠洗涤:加入 20mL 的平衡缓冲液,漩涡振荡重悬磁珠 30s 后进行磁性分离,移弃上清液;
该操作重复 3 次。
4.蛋白洗脱:在上述完成磁珠洗涤的离心管中加入适量的洗脱液进行蛋白洗脱。用移液器吹打或者涡旋振荡下迅速重悬,然后将离心管置于垂直混合仪混匀 10~15min 后进行磁性分离,收集上清液至新的离心管中。洗脱方式主要有高盐浓度洗脱(含1-2M的NaCl的平衡缓冲液)和低pH 洗脱(选择低于目标蛋白等电点的pH范围即可)两种。
5. 磁珠再生:一般采用2MNaCl溶液洗涤3~5 次,然后用平衡缓冲液进行再平衡处理。磁珠多次使用后会有沉淀蛋白、强疏水性蛋白、脂蛋白等杂质非特异性吸附到磁珠上,为了保证磁珠的使用效率,建议进行在位清洗(CIP)。
6. 在位清洗(CIP):依次采用1.0MNaOH、70%乙醇或 30%异丙醇、纯化水洗涤磁珠2次;最后加入20%乙醇重悬磁珠,置于2~8℃保存。
注意事项
1. 本产品不宜冷冻、干燥或离心操作。冷冻、干燥和离心等操作会引起磁珠团聚,不易于重悬和
分散,并且影响磁珠表面功能基团的化学活性。
2. 在使用本产品前,请务必充分振荡或超声使磁珠保持均匀的悬浮状态。
3. 使用过程中可根据需求,用纯化水或缓冲液磁吸洗涤磁珠2~3 次,以去除保存液中乙醇。
4. 本产品需与磁性分离设备配套使用。
5. 盐浓度与pH值均会影响特异性蛋白的结合与洗脱,客户需自行摸索不同蛋白的结合和洗脱条件,以保证蛋白纯化量和纯度。
6. 本产品仅供研究使用。
DEAE磁珠 Magrose DEAE 蛋白纯化磁珠
产品订购信息:
M0128 DEAE磁珠 Magrose DEAE 5mL/100ml