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品牌 | NobleRyder/诺博莱德 | 货号 | M0209 |
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规格 | 1ml | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 采用蛋白偶联技术将SA共价连接于固相载体表面,可高效结合生w素化抗体、核酸、蛋白 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
NobleRyder M0209 链霉亲和素磁珠粒径1μm Streptomycin magnetic beads
链霉亲和素磁珠粒径1μm-常备现货
产品货号:M0209
产品名称:链霉亲和素磁珠 粒径1μmStreptomycin magnetic beads
英文名称:Streptomycin magnetic beads
产品规格:1ml
产品简介:
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
NobleRyder M0209 链霉亲和素磁珠 粒径1μmStreptomycin magnetic beads具有ji高的结合亲和力(Kd=10^-15),在生物领域具有广泛的应用。Streptavidin采用蛋白偶联技术将SA共价连接于固相载体表面,可高效结合生wu素化抗体、核酸、蛋白等配体分子。本产品采用超顺磁性微球,粒径均一、形貌规整,有利于方便、快捷地捕获目标分子以及实现磁性分离。本产品可配套自动化设备进行高通量操作。
产品应用范围(仅供参考):
(1)免疫检测、分离蛋白、细胞分选等。Streptavidin可特异性地结合生wu素化抗体或抗原,作为免疫检测、ELISA等固相反应载体,或用于分选细胞等。
(2)分离核酸、制备核酸探针等。Streptavidin可特异性地结合生wu素化的核酸探针,广泛应用于DNA、RNA的杂交实验。
(3)DNA-蛋白质相互作用研究。Streptavidin可特异性地结合生wu素化的靶点DNA或RNA片段,可用于蛋白质与核酸相互作用研究。
结合生wu素化分子操作流程(仅供参考):
1.使用前准备
1.1 缓冲液:以下为常用的缓冲液成分,用户可根据需要调整缓冲液的盐浓度及pH
1.2 Buffer I(适用于结合生wu素化核酸):10mMTris-HCl(pH7.5),1mMEDTA,1MNaCl,0.01%~0.1%Tween-20
1.3 Buffer II(适用于结合生wu素化抗体/蛋白):PBS,pH7.4,含0.05%Tween-20,可根据需要添加0.01%~0.1%BSA
1.4 化学发光Washingbuffer:用户根据需求配制洗液,使用时平衡至室温
1.5 磁性分离器
1.6 漩涡振荡器
1.7 旋转混合仪
1.8 移液器及吸头
1.9 合适的离心管
2. 结合生wu素化核酸
2.1. 将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20s,振荡重悬磁珠。用移液器移取100μL磁珠到新的离心管中。将离心管置于磁性分离器上,静置1min(此操作后续简称为磁性分离),用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下离心管。
备注:用户可根据生wu素化分子的多少,参考产品信息表中磁珠的载量,计算需要取用的磁珠量。建议生wu素化分子的加入量为磁珠载量的1~2倍,使磁珠饱和。
2.2. 加入 1mLBuffer I 到离心管中,盖上离心管盖,充分振荡重悬磁珠。磁性分离,移去上清液。
备注:当步骤2.1取用磁珠体积大于1mL时,加入与磁珠体积相同的BufferI。
2.3. 重复“步骤2.2"一次。
2.4. 加入500μL 的用Buffer I稀释的生wu素化核酸(使磁珠浓度为2mg/mL),充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上,室温旋转混合30min。
2.5. 磁性分离,将上清液转移至新的离心管。
2.6. 按“步骤 2.2"的方法洗涤磁珠三次。
2.7. 根据后续实验的要求,加入合适的低盐缓冲液,重悬磁珠。至此结合生wu素化核酸步骤完成。磁珠可用于后续操作。
2.8. 用户可以通过测定反应前后核酸的浓度,计算结合到磁珠上的核酸量((反应前浓度反应后浓度)×反应溶液体积)。
3. 结合生wu素化抗体/蛋白操作流程
3.1. 将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20s,振荡重悬磁珠。用移液器移取100μL磁珠到新的离心管中。磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下离心管。
备注:用户可根据生wu素化分子的多少,参考产品信息表中磁珠的载量,计算需要取用的磁珠量。建议生wu素化分子的加入量为磁珠载量的1~2倍,使磁珠饱和。
3.2. 加入1mLBuffer II 到离心管中,盖上离心管盖,充分振荡重悬磁珠。磁性分离,移去上清液。
备注:当步骤3.1取用磁珠体积大于1mL时,加入与磁珠体积相同的BufferII。
3.3. 重复“步骤3.2"两次,共洗涤三次。
3.4. 加入1mL用Buffer II 稀释的生wu素化抗体/蛋白(使磁珠浓度为1mg/mL),充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上,室温旋转混合60min。
3.5. 磁性分离,将上清液转移至新的离心管。
3.6. 按“步骤3.2"的方法洗涤磁珠五次。
3.7. 根据后续实验的要求,加入BufferII或其他合适的缓冲液,重悬磁珠。至此结合生wu素化抗体/蛋白步骤完成。磁珠可用于后续操作。
4 磁微粒化学发光免疫诊断操作流程
4.1. 调整磁珠至合适浓度(建议0.2-0.8mg/mL),将磁珠置于漩涡振荡器上20s,振荡重悬磁珠。用移液器移取50μL 磁珠至96孔板中,磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下96孔板。
4.2. 每孔加入100μL生wu素化捕获抗体,充分震荡重悬磁珠,37℃恒温箱中孵育15min后,
磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下96孔板。
4.3. 每孔加入200μL的Washingbuffer,充分震荡重悬磁珠,磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下96孔板,该步骤再重复2次,共洗涤3次。
4.4. 每孔加入50μL 待测物标准品或待测样本,充分震荡重悬磁珠,37℃恒温箱中孵育15min后,磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下96孔板。
4.5. 每孔加入200μL 的Washingbuffer,充分震荡重悬磁珠,磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下96孔板,该步骤再重复2次,共洗涤3次。
4.6. 每孔加入100μL 酶标记抗体,充分震荡重悬磁珠,37℃恒温箱中孵育15min 后,磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下96孔板。
4.7. 每孔加入200μL 的Washingbuffer,充分震荡重悬磁珠,磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下96孔板,该步骤再重复2次,共洗涤3次。
4.8. 每孔加入150μL的底物液,充分震荡重悬磁珠,避光孵育5min。
4.9. 将 96 孔板放入化学发光仪读数,并进行相应数据处理。
注意事项:
1. 应避免对磁珠进行冷冻等操作。
2. 为减少磁珠损失,每次磁性分离的时间应不少于1min。
3. 从磁珠保存管中移取磁珠前应充分震荡重悬均匀。操作过程中应避免产生气泡。
4. 建议使用质量好的移液器吸头和反应管,避免因粘附磁珠及溶液而造成损失。
5. 生wu素化分子的大小会影响磁珠的载量。用户需要根据实验确定磁珠对特定生wu素化分子的载量。
6. 生wu素化分子的加入量应为磁珠载量的1~2倍,以使磁珠饱和。
7. 如需生wu素与SA磁珠分离,可采用:方法一:0.1%SDS,煮沸5min;方法二:pH=8.2,含95%甲酰胺的10mMEDTA中,65℃5min或90℃2min。脱落率95%。
8. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
9. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
链霉亲和素磁珠粒径1μm-常备现货
产品订购信息:
M0209 链霉亲和素磁珠 粒径1μmStreptomycin magnetic beads 1ml