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品牌 | NobleRyder/诺博莱德 | 货号 | E9828 |
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规格 | 20ml/100ml除DNA、蛋白质 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 用于清除DNA、蛋白质或其他液体样品中的内毒素 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
NobleRyder E9828 内毒素清除剂Endotoxin Erasol(for DNA solution)
产品货号:E9828
产品名称:内毒素清除剂Endotoxin Erasol(for DNA solution)
英文名称:Endotoxin Erasol(for DNA solution)
产品规格:20ml/100ml
内毒素清除剂 辅助试剂
产品简介:
储存条件:RT,有效期1年
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
NobleRyder E9828 内毒素清除剂Endotoxin Erasol(for DNA solution)
主要用于清除DNA、蛋白质或其他液体样品中的内毒素。在特定的pH值、盐浓度和温度条件下,内毒素清除剂能与 DNA、重组蛋白以及液体样品中的内毒素特异性结合,经过室温高速离心后,DNA 或蛋白质等保留在水相,而内毒素则被浓缩到极小体积的下层相而被清除。经过 3次以上重复抽提后可将活性为5000~50000 EU/mL的内毒素水平降低到5~0.5 EU/mL以下,即降低1000~10000 倍。
操作步骤:
1. 提取前请将内毒素清除剂放在冰上冰浴5min,期间翻转瓶子数次使试剂均匀预冷。
(1) 已纯化的质粒DNA内毒素清除:吸取500μL DNA溶液于微型离心管,加入1/10体积3M NaAc pH5.2 或1/20体积5M NaCl溶液,冰浴5min。
(2) 在提取质粒 DNA 过程中清除内毒素:以碱裂解法提取质粒为例,在加入裂解液和中和液并离心去除碎片之后,吸取含质粒DNA的上清于新离心管中,冰浴5min。
2. 加入1/5体积预冷的内毒素清除剂,振荡混匀,溶液变浑浊。
3. 冰浴5min,溶液应变清亮。
4. 37℃水浴5min,不时振荡,溶液又变浑浊。
5. 12000rpm 室温离心5min,溶液应分为两相,上层水相含DNA,下层油状相含内毒素。
6. 将含DNA的上层水相转移到新管,弃油状相,重复抽提三次,即重复步骤2-6三次。
7. 加入2.5 体积无水乙醇,-20℃沉淀30min或过夜;12000rpm离心10min,弃上清;加入70%乙醇洗涤沉淀,12000rpm离心5min弃上清;空气干燥沉淀,加入100~200μL无内毒素的高纯水或TE溶解沉淀。
8. 用内毒素检测试剂测定样品中内毒素活性,并与初始样品比较。
注意事项:
1. DNA浓度>1mg/mL时清除内毒素效率降低。由于DNA和蛋白质本身的性质,清除程序可导致10-20%的DNA丢失,所幸的是与清除内毒素的艰难相比DNA更容易提取制备。
2. 所有溶液应用无内毒素的高纯水配制,所有器械材料均应不含内毒素,玻璃器皿可高温烘烤,非挥发性水溶液可高压120℃高温处理。
内毒素清除剂 辅助试剂
产品订购信息:
E9828 内毒素清除剂Endotoxin Erasol(for DNA solution) 20ml/100ml