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Turbo感受态细胞 载体构建
  • 产品型号:C9118
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2025-03-18
  • 访  问  量:75
简要描述:

是采用大肠杆菌Turbo菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞。
Turbo感受态细胞 载体构建

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产品详情
品牌NobleRyder/诺博莱德货号C9118
规格10*100μl供货周期现货
主要用途核酸内切酶 (endA1)基因的缺失有利于提高质粒DNA的产量和质量应用领域环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药

NobleRyder C9118 Turbo感受态细胞

 

产品货号:C9118

产品名称:Turbo 感受态细胞

产品规格:10*100μl

Turbo感受态细胞 载体构建

产品简介:

储存条件:-70℃

 

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

NobleRyder C9118 Turbo 感受态细胞

是采用大肠杆菌Turbo菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞。Turbo 菌株是生长最快的大肠杆菌菌株,菌株平板上6.5小时可见克隆,摇菌4-6小时可提取质粒。核酸内切酶 (endA1)基因的缺失有利于提高质粒DNA的产量和质量。菌株的LacIq基因的表达受到严格控制,可克隆毒性基因。ΔlacZM15基因的存在可用于蓝白斑筛选。菌株还具有抗T1噬菌体感染的特点。Turbo感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率大于109cfu/μgDNA。

基因型:

F'proA+B+lacIqΔlacZM15/fhuA2Δ(lac-proAB)glnVgalK16galE15R(zgb-210::Tn10)TetSendA1thi-1Δ(hsdSmcrB)5

菌株抗性: 对氨苄qing霉素、氯mei素、卡na霉素、壮观mei素、链mei素、四huan素敏感。

操作方法:(以下操作均按无菌条件的标准进行)

1.将感受态细胞置于冰水浴中化冻。待细胞刚化冻后,加入质粒DNA或5-10μL连接产物到细胞中,用手指拨da管底,轻轻混匀。

2.冰水浴中静置30分钟。

3.42℃热击60秒钟,不要晃动。

4.冰水浴中静置2分钟。

5.加入500μL 的室温的SOC或LB培养基。

6.置于37℃摇床中,150-200rpm 震荡复苏培养60分钟。

7.取 50-100μL 菌液涂布在含有抗性的LB平板上。待液体吸干后,倒置平板,37℃过夜培养。

(平板划线分离法:复苏培养结束后,12000rpm 离心30秒钟,弃掉上清,留100μL左右的液体,用200μL 吸头轻轻吹打散菌块,取10μL重悬的菌液分多点滴在平板上,倾斜吸头,用吸头头部的侧面将滴在平板上的液体来回划线。这个方法可以获得更大的单克隆菌落。此方法主要适用于质粒转化,连接产物转化最好用涂布法。)

(质粒快速转化步骤:对于氨苄青mei素抗性的质粒,将步骤2的时间缩短到5分钟,完成步骤4后,可直接涂布或划线于含氨苄qing霉素抗性的LB平板上。其它抗性的质粒仍需60分钟的复苏培养。)

注意事项:

1.感受态细胞应保存在-70℃,不可反复冻融,否则其转化效率将会降低。

2.实验过程中应严格无菌操作,防止其它DNA或杂菌的污染,避免为以后的筛选、鉴定带来影响。

3.转化时,转化效率与外源DNA的浓度在一定范围内成正比,但当加入的外源DNA量过多或体积过大反而会降低转化效率。转化时DNA体积要小于感受态细胞体积的十分之一。

4.转化率的计算:转化率=产生菌落的总数/铺板DNA总量。

5.为防止转化实验不成功,可以保留部分连接产物,以重新转化,将损失降到最di。

Turbo感受态细胞 载体构建 

产品订购信息:

C9118 Turbo 感受态细胞  10*100μl

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