菌株来源于大肠杆菌K-12，生长速度快，主要用于噬菌体展示（PhageDisplay），也可进行M13噬菌体相关的实验，也可用于普通质粒的克隆构建及提取。
TG1感受态细胞 载体构建

NobleRyder C9958 TG1感受态细胞

产品货号：C9958

产品名称：TG1感受态细胞

产品规格：10*100ul

TG1感受态细胞 载体构建

产品简介：

储存条件：-70℃

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

NobleRyder C9958 TG1感受态细胞TG1 菌株来源于大肠杆菌K-12，生长速度快，主要用于噬菌体展示（PhageDisplay），也可进行M13噬菌体相关的实验，也可用于普通质粒的克隆构建及提取。lacZΔM15的存在可进行α互补原理上的蓝白斑筛选实验。由于该菌株不含核酸酶endA1 突变，提取的质粒中核酸酶含量较高，需用去蛋白液处理。TG1感受态细胞由特殊工艺制成，经 pUC19 质粒检测转化效率高达108cfu/μgDNA。

基因型：supEthi-1 _(lac-proAB) _(mcrB-hsdSM)5(rK– mK–) [F´ traD36 proAB lacIqZ _M15]

菌株抗性: 对氨苄青mei素、卡na霉素、壮guan霉素、博lai霉素、庆da霉素、氯mei素和四huan素敏感。

操作方法：（以下操作均按无菌条件的标准进行）

（以氨苄青mei素抗性的pUC19质粒为例）

1. 将感受态细胞置于冰水浴中化冻。待细胞刚化冻后，加入1-5μL含有1-100ng的质粒DNA 到细胞中，用手指

拨da管底，轻轻混匀。

2. 冰水浴中放置30分钟，不要晃动。

3. 42℃热击60秒钟，不要晃动。

4. 冰水浴中放置2分钟，不要晃动。

5. 加入500μL的室温的 SOC或LB培养基。

6. 置于37℃摇床中，150-200rpm，复苏培养60分钟。

7. 取50-100μL 菌液涂布在含有氨苄青mei素抗性的LB平板上。待液体吸干后，倒置平板 37℃培养 12-24 小时。

（平板划线分离法：复苏培养结束后，12000rpm 离心30秒钟，弃掉上清，留100μL左右的液体，用200μL吸头轻轻吹打散菌块， 取10μL重悬的菌液分多点滴在平板上，倾斜吸头，用吸头头部的侧面将滴在平板上的液体来回划线。这个方法可以获得更大的单克隆菌落。）

注意事项：

1．感受态细胞应保存在-70℃，不可反复冻融，否则其转化效率将会降低。

2．实验过程中应严格无菌操作，防止其它DNA或杂菌的污染，避免为以后的筛选、鉴定带来影响。

3．转化时，转化效率与外源DNA的浓度在一定范围内成正比，但当加入的外源DNA量过多或体积过大反而会降低转化效率。转化时DNA体积要小于感受态细胞体积的十分之一。

4．转化率的计算：转化率＝产生菌落的总数/铺板DNA总量。

5．为防止转化实验不成功，可以保留部分连接产物，以重新转化，将损失降到最di。

TG1感受态细胞 载体构建 

产品订购信息：

C9958  TG1感受态细胞  10*100ul