联系电话:10-62817090
品牌 | NobleRyder/诺博莱德 | 货号 | C9238 |
---|---|---|---|
规格 | 20*100ul | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 是采用大肠杆菌XL10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
NobleRyder C9238 XL10-Gold 感受态细胞
产品货号:C9238
产品名称:XL10-Gold 感受态细胞
产品规格:20*100ul
XL10-Gold 感受态细胞 载体构建
产品简介:
储存条件:-70℃
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
NobleRyder C9238 XL10-Gold 感受态细胞
是采用大肠杆菌XL10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。适用于高效的DNA克隆和质粒扩增。能保证高拷贝质粒的稳定复制。适合非甲基化DNA的转化。使用pUC19质粒检测,转化效率可达108cfu/µg。
基因型:
TetrΔ(mcrA)183Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173endA1supE44thi-1recA1gyrA96relA1lacHte[F′proABlacIqZΔM15Tn1 0(Tetr) AmyCamr]
抗生素耐药性:细胞具有四huan素和氯霉su抗性。
操作方法:(以下操作均按无菌条件的标准进行)
1. 取感受态细胞置于冰浴中。
2. 向感受态细胞悬液中加入目的DNA(100μl 的感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和),轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置30分钟。
3. 将离心管置于42℃水浴中放置60秒钟,然后快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却2分钟,该过程不要摇动离心管。
4. 向每个离心管中加入500μL无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃150rpm,摇床振荡培养60分钟,目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。
5. 无菌条件下,取适量菌液加到含相应抗生素的LB固体培养基平板上,用无菌的细菌涂布器或玻璃珠将细胞均匀涂开。等平板中的液体wan全吸收后,倒置平板,37℃培养 12-16 小时。
6. 保留剩余的菌液于4℃冰箱中,视平板上菌落生长情况决定去留。
注意事项:
1.感受态细胞应保存在-70℃,不可反复冻融,否则其转化效率将会降低。
2.实验过程中应严格无菌操作,防止其它DNA或杂菌的污染,避免为以后的筛选、鉴定带来影响。
3.转化时,转化效率与外源DNA的浓度在一定范围内成正比,但当加入的外源DNA量过多或体积过大反而会降低转化效率。转化时DNA体积要小于感受态细胞体积的十分之一。
4.转化率的计算:转化率=产生菌落的总数/铺板DNA总量。
5.为防止转化实验不成功,可以保留部分连接产物,以重新转化,将损失降到最di。
XL10-Gold 感受态细胞 载体构建
产品订购信息:
C9238 XL10-Gold 感受态细胞 20*100ul