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品牌 | NobleRyder/诺博莱德 | 货号 | R0898 |
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供货周期 | 现货 | 主要用途 | 采用硅胶膜离心吸附柱,适用于从培养细胞和动物组织中提取总RNA |
应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
NobleRyder R0898 柱式超纯动物RNA小提试剂盒Spin HiPure Animal RNA Mini Kit
产品货号:R0898
产品名称:柱式超纯动物RNA小提试剂盒Spin HiPure Animal RNA Mini Kit
英文名称:Spin HiPure Animal RNA Mini Kit
产品规格:50T
柱式超纯动物RNA小提试剂盒 质粒提取
产品简介:
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
NobleRyder R0898柱式超纯动物RNA小提试剂盒Spin HiPure Animal RNA Mini Kit
本产品利用RNA在特定缓冲体系下能够高效结合硅基质材料的原理,采用硅胶膜离心吸附柱,适用于从培养细胞和动物组织中提取总RNA,可以有效提取分子量大于200nt的RNA。提取过程中,无需使用苯fen氯仿等,采用DNase柱上处理,che底去除基因组DNA残留,提取的RNA样品经PCR检测不含基因组DNA,且极少含蛋白质和其它杂质的污染。本产品操作简单快速,且提取的RNA纯度高,可直接用于RT-PCR、Northernblot、构建cDNA文库等各种分子生物学实验。
注意事项:
自备材料:β-巯基乙醇、无水乙醇
1、Buffer RA 可能会形成沉淀,如果有沉淀出现,请于60℃加热溶解,然后待恢复至室温后使用。
2. 操作前请根据样品数量,按照1mlBufferRA中加入10μlβ-巯基乙醇的比例,配制裂解液。建议该裂解液现用现配。若配好的裂解液没有用完,可在4℃保存1个月。
3. 首ci使用,请在BufferRW2中加入48ml无水乙醇,并做好标记。
操作步骤(仅供参考):
1. 细胞或组织的裂解
1) 贴壁细胞:
che底吸弃培养液,按照每6-10cm2面积加入600μlBufferRA(使用前请加入β-巯基乙醇),用移液器吹打3-5次使细胞裂解。少于6-10cm2面积加入350μlBufferRA。
2) 细胞悬液:
500×g 离心收集细胞,che底吸弃培养液,每5×106-1×107细胞加入600μlBufferRA(使用前请加入β-巯基乙醇),用移液器吹3-5次使细胞裂解。少于5×106细胞加入350μlBufferRA。
3) 动物组织:
取600μl Buffer RA(使用前请先检查是否已加入β-巯基乙醇)加入到1.5ml离心管中。组织样品经液氮研磨后,将研磨成粉末状的样品(20-30mg)加入到上述1.5ml离心管中,剧烈震荡混匀直至裂解液中无明显沉淀。若组织样本低于20mg,则加入350μlBufferRA。
2. 向上述组织裂解混合物中加入590μlNuclease-freeWater(DEPC-treated)和 10μlProteinase K,混匀后56℃孵育10-20min。
3. 12,000 rpm 离心 2min,小心吸取管中的上清液转移至新的1.5ml离心管中,尽量避免触及管中的细胞碎片沉淀。
4. 缓慢加入0.5倍上清液体积的无水乙醇,混匀(此时可能会出现沉淀),将得到的溶液和沉淀一起转入SpinColumnswith Collection Tubes-RC(吸附柱放在收集管中),12,000rpm离心30s,弃除收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
5. 向吸附柱中加350μlBufferRW1,12,000rpm离心30s,弃除收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
6. 配制RNase-free DNase 工作液:取10μlRNase-free DNase,加入至新的RNase-free 离心管中,加70μl Buffer DB,混合均匀,配制成终体积为80μl的RNase-freeDNase工作液。
7. 向吸附柱中央加入80μlRNase-freeDNase工作液,室温放置15min。
8. 向吸附柱中加入350μlBufferRW1,12,000rpm离心30s,弃除收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
9. 向吸附柱中加入500μlBufferRW2(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12,000rpm离心30s,弃除收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
10. 重复操作步骤9一次。
11. 将吸附柱放回收集管中,室温12,000rpm离心3min。
注:此步骤十分重要,否则BufferRW2中残留的乙醇会影响后续实验。
12. 将吸附柱放入一个新的1.5ml 离心管(DNase/RNase-free),加入50-100μlBufferTB,室温放置1-2min,12,000 rpm 离心1min,得到RN溶液。所得的RNA应立即使用或适量分装后-80℃保存,避免反复冻融。
注意事项:
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
柱式超纯动物RNA小提试剂盒 质粒提取
产品订购信息:
R0898 柱式超纯动物RNA小提试剂盒Spin HiPure Animal RNA Mini Kit 50T