溶酶体是由一层单位膜包围，内含多种酸性水解酶的泡状结构。溶酶体含有 40 多种水解酶，其中包括蛋白酶、核酸降解酶和糖苷酶等。其主要功能是对细胞内物质的消化作用。此外溶酶体与器官形成、激素分泌的调节以及某些疾病的发生密切相关。
溶酶体提取试剂盒 蛋白提取

诺博莱德 溶酶体提取试剂盒 蛋白提取

NobleRyder P5107 溶酶体提取试剂盒

产品货号：P5107

产品名称：溶酶体提取试剂盒

产品规格：50T/100T

产品简介：

中文名称：溶酶体提取试剂盒

规格：100T ; 50T

储存条件：2-8℃，1 year

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

NobleRyder P5107 溶酶体提取试剂盒

溶酶体是由一层单位膜包围，内含多种酸性水解酶的泡状结构。溶酶体含有40多种水解酶，其中包括蛋白酶、核酸降解酶和糖苷酶等。其主要功能是对细胞内物质的消化作用。此外溶酶体与器官形成、激素分泌的调节以及某些疾病的发生密切相关。溶酶体提取试剂盒可用于各种动物细胞和实体软、硬组织样本的溶酶体提取。提取的溶酶体具有生物活性，可以用于溶酶体功能研究、溶酶体染色、溶酶体蛋白提取等各种下游应用。可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。

适用样本：动物细胞/组织

注：

1. 提取液长期不用时置于-20℃保存。

2. 试剂拆封后请尽快使用完！

产品简介：

溶酶体是由一层单位膜包围，内含多种酸性水解酶的泡状结构。溶酶体含有 40 多种水解酶，其中包括蛋白酶、核酸降解酶和糖苷酶等。其主要功能是对细胞内物质的消化作用。此外溶酶体与器官形成、激素分泌的调节以及某些疾病的发生密切相关。

溶酶体提取试剂盒可用于各种动物细胞和实体软、硬组织样本的溶酶体提取。提取的溶酶体具有生物活性，可以用于溶酶体功能研究、溶酶体染色、溶酶体蛋白 提取等各种下游应用。

自备试剂和仪器：

离心机、振荡器、匀浆器、涡旋混匀器、移液器、冰箱、冰盒，PBS 缓冲液、离心管、吸头、一次性手套

使用方法：

一、使用注意事项：

1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

2. 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

3. 最好使用 Dounce 匀浆器匀浆，如果没有 Dounce 匀浆器，也可用普通玻璃匀浆器匀浆，但是溶酶体回收率会下降。

4. 若实验室离心机较小达不到 30000×g 离心力，或者离心管质量不能承受 30000×g 离心力，请使用能达到的最大离心力。

二、细胞溶酶体提取：

1. 取 1-2×10⁷ 个细胞，在 4℃，500×g 条件下离心 5 分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞；

【注】：

1) 贴壁培养细胞用yi酶消化下来或者用刮刀刮取均可。

2. 用冷 PBS 洗涤两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。

【注】：

1) PBS 重悬细胞，300×g -500×g，2-8°C，离心时间 5 分钟收集细胞。

3. 加入 400 μl 冷的试剂 A，置冰上静置 10 分钟。

4. 用 Dounce 匀浆器匀浆 30-40 下。

【注】：

1) 先用 Dounce 匀浆器的松型槌初步匀浆 10-20 次，再用紧型槌匀浆 20-30 次。

2) 每上下一个来回为一次。

5. 匀浆液在 4℃，1000×g 力条件下离心 5 分钟。弃沉淀，收集上清。

6. 将上清在 4℃，3000×g 力条件下离心 10 分钟。弃沉淀，收集上清。

7. 将上清在 4℃，5000×g 力条件下离心 10 分钟。弃沉淀，收集上清。

8. 将上清在 4℃，20000-30000×g 力条件下离心 20 分钟。弃上清，收集沉淀。

【注】：

1) 如果用大的离心转头，液体量太少不好离心的话，可以将小离心管套入大离心管使用，或者添加 PBS 增加液体量。

2) 若实验室离心机较小达不到 20000×g 离心力，或者离心管质量不能承受 20000×g 离心力，请使用能达到的最大离心力，只要在 16000×g 以上，也能获得较好的回收率。

9. 在沉淀中加入 400 μl 冷的试剂 B，混匀。

10. 在 4℃，20000-30000×g 力条件下离心 20 分钟。弃上清，收集沉淀。

【注】：

1) 如果用大的离心转头，液体量太少不好离心的话，可以将小离心管套入大离心管使用，或者添加 PBS 增加液体量。

2) 若实验室离心机较小达不到 20000×g 离心力，或者离心管质量不能承受 20000×g 离心力，请使用能达到的最大离心力，只要在 16000×g 以上，也能获得较好的回收率。

11. 沉淀用溶酶体保存液 C 重悬。

【注】：

1) 也可以不用试剂 C，直接根据下游应用用合适的缓冲液重悬保存或直接用于下游蛋白提取等实验。

12. 即得到溶酶体样品，置冰箱保存备用或直接用于下游实验。

三、组织溶酶体提取：

1. 取 50-100 mg 新鲜动物组织样本，用 PBS 清洗干净。

2. 用手术jian刀尽可能剪碎，用冷 PBS 洗涤两次。

3. 加入 400 μl 冷的试剂 A，置冰上静置 10 分钟。

4. 用 Dounce 匀浆器匀浆 30-40 下。

【注】：

1) 先用 Dounce 匀浆器的松型槌初步匀浆 10-20 次，再用紧型槌匀浆 20-30 次。

2) 每上下一个来回为一次。

5. 匀浆液在 4℃，1000×g 力条件下离心 5 分钟。弃沉淀，收集上清。

6. 将上清在 4℃，3000×g 力条件下离心 10 分钟。弃沉淀，收集上清。

7. 将上清在 4℃，5000×g 力条件下离心 10 分钟。弃沉淀，收集上清。

8. 将上清在 4℃，20000-30000×g 力条件下离心 20 分钟。弃上清，收集沉淀。

【注】：

1) 如果用大的离心转头，液体量太少不好离心的话，可以将小离心管套入大离心管使用，或者添加 PBS 增加液体量。

2) 若实验室离心机较小达不到 20000×g 离心力，或者离心管质量不能承受 20000×g 离心力，请使用能达到的最大离心力，只要在 16000×g 以上，也能获得较好的回收率。

9. 在沉淀中加入 400 μl 冷的试剂 B，混匀。

10. 在 4℃，20000-30000×g 力条件下离心 20 分钟。弃上清，收集沉淀。

【注】：

1) 如果用大的离心转头，液体量太少不好离心的话，可以将小离心管套入大离心管使用，或者添加 PBS 增加液体量。

2) 若实验室离心机较小达不到 20000×g 离心力，或者离心管质量不能承受 20000×g 离心力，请使用能达到的最大离心力，只要在 16000×g 以上，也能获得较好的回收率。

11. 沉淀用溶酶体保存液 C 重悬。

【注】：

1) 也可以不用试剂 C，直接根据下游应用用合适的缓冲液重悬保存或直接用于下游蛋白提取等实验。

12. 即得到溶酶体样品，置冰箱保存备用或直接用于下游实验。

注意事项：

1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得优良实验效果。

2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。

5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻di清除残留清洁剂。

6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

7. 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。

8. 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

9. 如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。

溶酶体提取试剂盒 蛋白提取

产品订购信息：

P5107  溶酶体提取试剂盒  50T/100T