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品牌 | NobleRyder/诺博莱德 | 货号 | D9598 |
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规格 | 50T / 100T | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 将高品质的 DNA 纯化至小洗脱体积中 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
石蜡包埋组zhi基因组提取试剂盒 质粒提取
NobleRyderD9598 石蜡包埋组zhi基因组提取试剂盒
产品货号:D9598
产品名称:石蜡包埋组zhi基因组提取试剂盒
产品规格:100T/50T
产品简介:
储存条件:Store at 2-8℃,avoid light,1 year.
NobleRyderD9598 石蜡包埋组zhi基因组提取试剂盒本试剂盒采用特殊的脱蜡液和裂解条件释提取石蜡包埋组织切片中的 DNA,克服了福尔马林交联造 成的抑制效应。该试剂盒通过特异性结合 DNA 的离心吸附柱和du特的缓冲液系统,将高品质的 DNA 纯化至小洗脱体积中。提取的基因组完整性好,纯度高,质量稳定可靠。
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
操作步骤:
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入休积请参照瓶体上的标签(每瓶需要单独加入45mL无水乙醇)。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1、样本处理
a. 石蜡切片:取石蜡切片(5-10 μm厚,1×1 cm2 大小)5-8张。
b. 石蜡块:手shu刀刮取约30 mg的组织样本(尽量去除多余的石蜡)。 注意:如果样品表面暴露于空气中,最初刮取的2-3片弃掉不用。
c.福尔马林等固定液中的样本:取30 mg样本,用手shu刀切为数块,置于1.5 ml离心管中,加入500μl PBS (0.01M,pH7.4)涡旋振荡混匀,12,000 rpm室温离心1 min, 弃上清,重复3次,然后从步骤7开始操作。
2. 脱蜡(二选一)
a. 脱蜡液脱蜡
加入l mL脱蜡液,充分振荡,65℃水浴30 min,再次充分振荡,4℃下15000 rpm离心1 5 min,弃上清再加1 mL 脱蜡液,重复3遍。然后从步骤7开始操作。
b. 二甲苯脱蜡
将石蜡切片或石蜡块样本装于1.5 ml无菌离心管中,加入1 ml二甲苯,剧烈涡旋10 -15s。然后从步骤3开始操作(二甲苯需要客户自备)。
3、12000 rpm 室温离心2 min,弃上清。注意:不要倒掉沉淀。
4、 在上述管中加入1 ml无水乙醇,涡旋混匀10s。
5、12,000 rpm(~13,400×g )室温离心 2 min,弃上清。注意:不要倒掉沉淀。
6、室温放置5-10 min,充分挥发乙醇。
7、向沉淀中加入200 μl缓冲液A和20μl蛋白酶K、2μl RNase A,充分混匀,56℃水浴消化1h-3h直至样本wan全裂解。消化期间可颠倒离心管混匀数次,直至样品消化wan全为止。消化wan全的指标是:液体清亮及粘稠。
8、加入200ul 体积溶液B,充分颠倒混匀,如出现白色沉淀,可放置于75℃ 15-30min,沉淀即会消失,不影响后续实验。如溶液未变清亮,说明样品消化不che底,可能导致提取的 DNA 量少及不纯,还有可能导致堵塞吸附柱。
9、加入200ul无水乙醇,充分混匀,此时可能会出现絮状沉淀,不影响DNA的提取,可将溶液和絮状沉淀都加入吸附柱中。
10、12000rpm 离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
11、向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
12、向吸附柱中加入600ul漂洗液,12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
13、12000rpm 离心 2min,将吸附柱敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,否则漂洗液中的乙醇会影响后续的实验,如酶切、PCR等。
14、将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加50-200ul经65℃水浴预热的洗脱液,室温放置5min,12000rpm离心2min。
15、可将离心所得洗脱液再加入吸附柱中,12000rpm离心2min,即可得到高质量的基因组DNA。
注意事项:
1、试剂盒拆封后,RNase A和蛋白酶K需放置-20℃保存。
2、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
3、如果试剂盒中的溶液出现沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影响效果。
4、洗脱缓冲液的体积最好不少于50ul,体积过小会影响回收效率:洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响,若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的pH值调至此范围),pH 值低于7.0会降低洗脱效率。
5、本产品所提DNA的完整性依赖于样本类型、储存时间以及固定条件。如果甲醛固定时间过长(超过24h)或样本存放时间过久(>1年)则易导致DNA完整性受损,无法扩出长片段。
石蜡包埋组zhi基因组提取试剂盒 质粒提取
产品订购信息
D9598 石蜡包埋组zhi基因组提取试剂盒 100T
D9598 石蜡包埋组zhi基因组提取试剂盒 50T