胞浆蛋白/核蛋白/组蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种原代或传代培养动物细胞和各种动物实体组织样品中提取胞浆蛋白/核蛋白/组蛋白。本试剂盒含有的独te配方能够有效溶解细胞膜组份。
胞浆蛋白核蛋白组蛋白提取试剂盒

诺博莱德 胞浆蛋白/核蛋白/组蛋白提取试剂盒

NobleRyder P4957 胞浆蛋白/核蛋白/组蛋白提取试剂盒

产品货号：P4957

产品名称：胞浆蛋白/核蛋白/组蛋白提取试剂盒

产品规格：50T/100T

胞浆蛋白核蛋白组蛋白提取试剂盒

产品简介：

中文名称：胞浆蛋白/核蛋白/组蛋白提取试剂盒

规格：100T ; 50T

储存条件：2-8℃，1 year

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

胞浆蛋白/核蛋白/组蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种原代或传代培养动物细胞和各种动物实体组织样品中提取胞浆蛋白/核蛋白/组蛋白。本试剂盒含有的独te配方能够有效溶解细胞膜组份。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。本试剂盒提取的蛋白可用于esternBlotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gelshift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白，下游应用范围广，提取液裂解细胞的能力较温和，需要根据实际样本情况优化裂解时间。本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。

适用样本：动物细胞/组织

注：

1. 蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。

2. 蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

3. 试剂拆封后请尽快使用完！

产品简介：

胞浆蛋白/核蛋白/组蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种原代或传代培养动物细胞和各种动物实体组织样品中提取胞浆蛋白/核蛋白/组蛋白。本试剂盒含有的独te配方能够有效溶解细胞膜组份。

本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。

本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift 凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。

本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白，下游应用范围广，提取液裂解细胞的能力较温和，需要根据实际样本情况优化裂解时间。

本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。

自备试剂和仪器：

离心机、振荡器、匀浆机/匀浆器、涡旋混匀器、移液器、冰箱、冰盒，PBS缓冲液、蛋白定量试剂盒，离心管、吸头、一次性手套

产品特点：

1、使用方便，从细胞，组织中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。

2、提取过程简单方便。

3、含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。

4、紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。

5、蛋白提取液含多种有效成分，可以充分释放胞浆蛋白、核蛋白和膜蛋白，又可结合释出的蛋白防止沉淀。

6、蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含 6 种独立的蛋白酶抑制剂，每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括si氨酸蛋白酶、半guang氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

使用方法：

一、使用注意事项：

1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得优良实验效果

2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

3. 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

4. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

5. 如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。

6. 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

7. 下游实验如果是进行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性检测，提取液可以不加蛋白酶抑制剂或磷酸酶抑制剂，注意提取过程保持低温操作，缩短离心时间。

8. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

9. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。

二、细胞蛋白提取

1. 提取液制备：

每 200μl 蛋白提取液 A 中加入 1μl 蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。

每 200μl 蛋白提取液 B 中加入 1μl 蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。

2. 取5-10×10⁶个细胞，在4℃，1000×g 条件下离心5分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。

3. 用冷 PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。

4. 每 5-10×106个细胞中加入 400μl 冷的提取液 A，高速涡旋振荡 15 秒或吹打混匀，置 2- 8℃条件振荡 20-30 分钟。

5. 然后在 4℃，5000×g 条件下离心 10 分钟。

6. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到胞浆蛋白，请置于冰上或-80℃冰箱保存备用。

7. 沉淀用 200μl PBS 洗涤一次，在 4℃，5000×g 条件下离心 5 分钟，弃上清。

8. 在沉淀中加入 100μl 冷的提取液 B，高速涡旋振荡 5 秒。

9. 置 2-8℃条件振荡 20 分钟。

10. 在 4℃，16000×g 条件下离心 15 分钟。

11. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。留沉淀用于下步的组蛋白/染色质相关蛋白提取。

12. 在沉淀中加入 100μl 组蛋白提取液 C，充分混匀。

13. 用 200μl 枪头反复吹打混匀或充分涡旋振荡混匀，置 4℃冰箱过夜存放。

14. 在 12000×g 条件下离心 10 分钟，收集上清。

15. 在上清中加入 10-20μl 试剂 D 充分混匀，即得到组蛋白。

16. 在组蛋白样品中加入上样缓冲液混匀后煮沸，分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

三、组织蛋白提取

1. 提取液制备：

每 200μl 蛋白提取液 A 中加入 1μl 蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。

每 200μl 蛋白提取液 B 中加入 1μl 蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。

2. 取适量组织样本，用手术jian刀尽可能剪碎，加冷 PBS，用组织匀浆机/匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体，冰上静置 5 分钟，小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。

3. 在 4℃，500×g 条件下离心 5 分钟，弃上清。

4. 每 20-30μl 细胞沉淀体积（20mg 组织）中加入 200μl 冷的提取液 A，高速涡旋振荡 15 秒或吹打混匀，置 2-8℃条件振荡 20-30 分钟。

5. 然后在 4℃，5000×g 条件下离心 10 分钟。

6. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到胞浆蛋白，请置于冰上或-80℃冰箱保存备用。

7. 沉淀用 PBS 洗涤一次，在 4℃，5000×g 条件下离心 5 分钟，弃上清。

8. 在沉淀中加入 100-200μl 冷的提取液 B，高速涡旋振荡 5 秒。

9. 置 2-8℃条件振荡 30 分钟。

10. 在 4℃，16000×g 条件下离心 10-15 分钟。

11. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。留沉淀用于下步的组蛋白/染色质相关蛋白提取。

12. 在沉淀中加入 100μl 组蛋白提取液 C，充分混匀。

13. 用 200μl 枪头反复吹打混匀或充分涡旋振荡混匀，置 4℃冰箱过夜存放。

14. 在 12000×g 条件下离心 10 分钟，收集上清。

15. 在上清中加入 10-20μl 试剂 D 充分混匀，即得到组蛋白。

16. 在组蛋白样品中加入上样缓冲液混匀后煮沸，分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

注意事项：

1. 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。

2. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻di清除残留清洁剂。

3. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

4. 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

5. 如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。

胞浆蛋白核蛋白组蛋白提取试剂盒

产品订购信息：

P4957  胞浆蛋白/核蛋白/组蛋白提取试剂盒  50T/100T